Tlhahiso ea inshorense ea liphatsa tsa lefutso

Insulin - hormone ea pancreatic e laolang | carbohydrate metabolism le ho boloka boemo bo tloaelehileng ba cazdpamading. Ho haella ha hormone ena 'meleng ho lebisa.) Ho e' ngoe ea maloetse a tebileng ka ho fetisisa - lefu la tsoekere, leo, e le sesosa sa lefu, le leng sebakeng sa boraro kamora mafu a pelo le mofets'e. Insulin ke globule e nyane | protheine e nang le masalla a 51 a amino acid mme e na le liketane tse peli tsa polypeptide tse hokahaneng hammoho ka marokho a mabeli. E entsoe ka mokhoa oa "ketane" ea "fetus" e le 'ngoe, e nang le koi peptide e bohareng ea maqhubu (masala a 23 a amino acid) le peptide e hokahanyang e 35 (C-peptide). Ha peptide ea lets'oa e tlosoa, li-proinsulin tse setseng litsong tse 85 tsa amino acid li etsoa ka seleng, eo ho eona lihokelo tsa "insulin" tsa A le B li hokahanengC-neitweed, e ba fang mokhoa o hlokahalang ho $ 3 ho bond e se nang likamano. Kamora hore protheine ea protheine ea C peptide e hlahe, ho thehoa insulin.

Mefuta e 'maloa ea lefu la tsoekere ea tsebahala. Foromo e boima ka ho fetisisa, bakeng sa kalafo eo mokuli a e hlokang ea lefu la insulin (mofuta o itšetlehileng ka insulin ea lefu lena), e bakoa ke lefu le ikhethileng la lisele tse kopantseng li-hormone (lisele tsa li-isanger tsa Langerhans ka pancreas). Mofuta oa lefu la tsoekere mellitus, oo ho oona ho sa hlokeng phekolo ka insulin, o ata haholo, o ka laoloa ka thuso ea lijo tse nepahetseng mme o re:> ma. Ka tloaelo, makhopho a likhomo le a likhomo ha a sebelisoe indastering ea nama le ea makeneng 'me a beoa ka likariki tse halikiloeng bakeng sa lik'hamphani tsa meriana moo ho ntšitsoeng lihormone ho sebetsoang teng. Ho fumana 100 g cr! Thallic insulin e hloka 800-1000 kg ea meroho

Tsela ea liketane ka bobeli le ho hokahana ha litlamo tsa bona tsa disudfid ho fumana insulin li ile tsa etsoa ka 1963 le 1965. lihlopha tse tharo tsa lipatlisiso tsa USA, China le Jeremane. Ka 1980, khamphani ea Danish Novo Industri e ile ea qapa mokhoa oa ho fetola insulin ea "pig" ho "insulin" ea motho ka ho fetola masala a 30 a alanine ka ketane ea B le masala a threonine. Ka bobeli insulin e ne e sa fapana tšebetsong le ka nako ea ketso.

Mosebetsi oa boenjiniere ba insulin o qalile lilemong tse 20 tse fetileng. Ka 1978, ho ile ha hlaha molaetsa mabapi le ho hlahisoa ha mofuta oa Escherichia coli o hlahisang likhakanyo tsa likhoto (USA). Ka selemo se le seng, liketane tsa insulin tsa motho ka mong li ne li etsoa ka mokhoa oa polelo ea mofuta oa tsona oa maiketsetso liseleng.E.coli(Mt. 5.11). Mofuta o mong le o mong oa mofuta o kopantsoeng o ne o ts'oaretsoe ho isa qetellong ea 3'-genous ea enzyme (3-galactosidase) mme e kenngoa ka har'a vector plasmid(pBR322).LiseleE.colie fetotsoe ka li-plasmid tse joalo tse recombinant, liprotheine tsa hybrid (chimeric) li ile tsa hlahisoa tse nang le sekhechana sa p-galactosidase le A kapa B insulin peptide e khokhothetsoeng ho eona ka masala a methionine. Ha ho sebetsoa protheine ea chimeric ka cyanogen bromide, peptide e tsoa. Leha ho le joalo, ho koaloa ha marokho a sa senyeheng pakeng tsa liketane tsa insulin ho ne ho le thata.

Ka 1981, pro-insulin analogue, mini-C-pro-insulin, e entsoe, eo karolo ea 35-unit C-peptide e ileng ea nkeloa sebaka ke karolo ea li-amino acid tse 6: Arro-gly-ser-lys-arg mme polelo ea eona e bontšitsoe hoE.coli.

Ka 1980, W. Gilbert le basebetsi-mmoho le eena ba ile ba qhekella "insulin mRNA" ho tsoa pancreatic P-cell tumor mme ba fumana CDNA ho eona ba sebelisa transcriptase e khutlisetsang. CDNA e ileng ea hlaha e ile ea kenngoa ka har'a plasmidpBR322E.colibohareng ba mofuta oa penicillinase. Prasminant plasmid e ne e na le tlhahisoleseling mabapi le sebopeho sa proinsulin.Ka lebaka la phetolelo ea mRNA, protheine e nyalisitsoeng e entsoe ka liseleng tse nang le penicillinase le tatellano ea li-proinsulin, tse neng li entsoe ka trypsin ho tsoa liprotheine tse joalo.

Ka 1978, basebetsi ba Setsi sa Bioorganic Chemistry se neng se etelletsoe pele ke Acad. Yu A. A. Ovchinnikov, mefuta e 'meli ea sebopeho e hlophisitseng motsoako oa li-neuropeptide e ne e entsoe:leucine- enkephalin le bradykinin.Mofuta oa leucine enkephalin o kopantsoeng o bile le lipalo tse peli "tse thata":

Mofuta oa maiketsetso o hlahisitsoeng o ile oa kenngoa hammoho le sekhechana sa tlhaho sa DNA se nang le morekisi le karolo ea projeke ea E. coli P-galactosidase geneE.coliho plasmid

Ho fumana insulin, mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso, Biotechnology - Coursework

1. Sebopeho le mesebetsi ea insulin 5

1.1. Sebopeho sa molek'hule ea "insulin"

1.2. Bohlokoa ba tlhaho ea insulin 7

1.3. Insulin Biosynthesis 8

2. Ho tsoaka liphatsa tsa lefutso tsa genetic 10

2.1. Tšebeliso ea mekhoa ea boenjiniere ea liphatsa tsa lefutso bakeng sa litlhare tsa 10

2.2. Mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso 11

2.3. Tlhahiso ea tlhahiso ea "insulin" ea tlhaho

E qotsitsoe temaneng

Ho feta moo, likarolo tsena ka bobeli li ka ba teng ka nako e ts'oanang sebopeho sa protheine e nyalisitsoeng. Ntle le moo, ha o theha liprotheine tse nyane tsa "hybrid", ho ka sebelisoa liprotheine tse 'maloa - ho ba teng ha likopi tse' maloa tsa polypeptide e fumanehang ka har'a protheine e nyalisitsoeng, e ka eketsang haholo tlhahiso ea sehlahisoa.

UK, maqhoele a mabeli a insulin ea motho a entsoe ka mofuta oa E. coli, a hokahantsoe le molek'hule ea lihormone tse sebetsang. E le hore sebopuoa se nang le unicellular se khone ho kopanya limolek'hule tsa "insulin" likhoeleng tsa eona, ho hlokahala hore e e fane ka lenaneo le hlokahalang, ke hore, ho hlahisa gene ea hormone ho eona.

Insulin e kopanyang e fumanoe Setsing sa Setsi sa Mahlale sa Russia se sebelisang liphatsa tsa lefutso tsa E. coli. Protheine ea lebasetere e nyalisitsoeng e hlahisoa ho tloha biomass e holileng, e hlahisoang ka bongata

40. ea protheine eohle ea sele e nang le li-prypinsulin.

Phetoho ea eona ea "insulin in vitro" e etsoa ka tatellano e ts'oanang le ea vivo - polypeptide e etelletsoeng pele e hlakotsoe, preproinsulin e fetoloa ho insulin ka methati ea oxidative sulfitolysis, e lateloe ke ho koala ho koalloang ha litlamo tse tharo tsa disulfide le ho ikhetholla ha enjine ea C-peptide. Ka mor'a phapanyetsano ea li-ion tse 'maloa, tlhoekiso ea chromatographic ea gel le HPLC, insulin ea motho ea bohloeki bo phahameng le mesebetsi ea tlhaho e fumanoa.

Ho fumana insulin, mohatla o sebelisoa ka tatellano ea nucleotide e kentsoeng ka har'a plasmid e bontšang protheine e nyalisitsoeng e nang le protheine ea methapo le sekotoana sa protheine ea Staphylococcus aureus e hokahantsoeng le N-terminus ea eona ka masala a methionine 8, 9, 10.

Ho lengoa ha mefuta e felletseng ea lisele tsa "recombinant" ho fana ka qalo ea tlhahiso ea protheine e nyalisitsoeng, ho itšehla thajana le phetoho e latellanang eo tube e lebisang ho insulin.

Mokhoa o mong hape oa khoneha: ho fumana ts'ebetsong ea baktheria ea protheine e kopantsoeng e nang le mohatla oa proinsulin le polyhistidine e khomaretsoeng ho eona ka masala a methionine. E qheletsoe ka thoko e sebelisa chlate ea "chlateat" "likholumong tse nang le Ni-agarose le bromine cleavage.

Protheine e ikemetseng e S- sulfonated. Ho etsa limmapa le tlhahlobo ea bongata ba litšoantšo tsa proinsulin e fumanoeng e hloekisitsoeng ke ion phapanyetsano ea chromatography ho phapanyetsano ea anion le RP (karolo e khutliselitsoeng morao) ts'ebetso e phahameng ea metsi chromatography e bonts'a ho ba teng ha marokho a arohantsoeng le li-proinsulin tsa motho oa mehleng.

Haufinyane, ho se ho shebiloe tlhokomelo e haufi-ufi ho nolofatsa mokhoa oa ho hlahisa insulin e kopantsoeng ke boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso.Ka mohlala, o ka fumana protheine e nang le proinsulin e khomaretsoeng N-terminus ka masala a lysine a peptide ea moeta-pele oa li-interleukin

2. protheine e hlahisoa ka nepo le moo e fumanehang 'meleng ea kenyelletso. Kamora ho ikhetholla, protheine ea ho hlahisa insulin le C-peptide e khokhothetsoe ka trypsin 5, 8, 10.

Insulin e hlahisoang le C-peptide e hloekisoa ke RP-HPLC. Bohlokoa haholo ha ho thehoa meralo e hlophisitsoeng ke boholo ba protheine e tsamaisang le polypeptide e lebisitsoeng.

C-peptide ka thuso ea li-spacers tsa amino acid tse nkileng sebaka sa thibelo ea Sfi I le masala a mabeli a arginine qalong le qetellong ea sekotjana bakeng sa tšilo ea liprotheine tsa trypsin tse latelang li hokahane ho latela molao-motheo oa mohatla.

HPLC ea lihlahisoa tsa cleavage e bonts'a hore khakanyo ea C-peptide e tsoela pele ka bongata, mme sena se lumella ts'ebeliso ea mefuta ea maiketsetso ea multimeric ho hlahisa li-polypeptides tse reriloeng setsing sa indasteri.

Qeto

Ka mehla, 'me maemong a mangata, tsela feela ea ho boloka bophelo le matla a bakuli ba nang le lefu la tsoekere ke kajeno, insulin.

Pele o amohela le ho kenya insulin ts'ebetsong ea bongaka, ho ne ho lebelletsoe phello e bolaeang bakeng sa selemo se le seng kapa tse peli ho tloha ho qaleheng ha lefu la bakuli ba lefu la tsoekere la Mofuta ona, leha ho sa sebelisoe lijo tse fokolisang haholo.

Bakuli ba Type I lefu la tsoekere ba hloka kalafo ea ho khutlisa bophelo bohle ka litokisetso tsa insulin. Ho felisoa ha tsamaiso ea insulin ea kamehla ka lebaka le le leng kapa ho hong ho baka kholo ea mathata le lefu le potlakileng la mokuli.

Hajoale, ho ata ha lefu la tsoekere ho sebakeng sa boraro ka mor'a mafu a tsamaiso ea pelo le methapo e mpe. Ho ata ha lefu la tsoekere ho batho ba baholo, ho ea ka Mokhatlo oa Lefatše oa Bophelo, libakeng tse ngata tsa lefatše ke 2-5% mme ho batla ho eketseha mong le e mong.

Lilemo tsa 1. palo ea bakuli e batla e imena habeli. Palo ea bakuli ba itšetlehileng ka insulin, leha ho na le tsoelo-pele e totobetseng lefapheng la tlhokomelo ea bophelo bo botle e ntse e eketseha selemo se seng le se seng, 'me hajoale Russia feela ke batho ba limilione tse peli.

Mekhoa e tšepisang ka ho fetisisa ea ho hlahisa insulin ke mekhoa ea boenjiniere ea liphatsa tsa lefutso. Insulin e entsoe ka liphatsa tsa lefutso e fumanoa ka liketane tse hlahisang A le B ka ho arola molek'hule e fapaneng, 'me e lateloa ke karohano ea isoforms le mofuta oa proinsulin o liseleng tsa E. Coli tse nang le cleavage e nang le trypsin le carboxypeptidase.

Ho thehoa ha lithethefatsi tsa insulin ea malapeng tse hlahisitsoeng ka liphatsa tsa lefutso ho bula menyetla e mecha ea ho rarolla mathata a mangata a lefu la tsoekere la Russia e le ho pholosa bophelo ba batho ba limilione ba lefu la tsoekere.

Lingoliloeng

Balabolkin M.I., Klebanova E.M., Kreminskaya V.M. Lefu la tsoekere: likarolo tsa morao-rao tsa tlhahlobo ea kalafo le kalafo / Ngaka, ed. G.L. Vyshkovsky.-2005- M: RLS-2005, 2004- 960 leq.

Gavrikov, A.V. Khetho ea tlhahiso ea biotechnological ea li-lintho tse ling tse kopanyang li-transferon tsa motho: dis. ... lipompong. biol. Mahlale - M, 2003

Ka tlhaho ho entsoe insulin ea motho. Ho eketsa katleho ea karohano ea chromatographic u sebelisa mohopolo oa bifunctionality. / Romanchikov A.B., Yakimov S.A., Klyushnichenko V.E., Arutunyan A.M., Wulfson A.N. // Bioorganic Chemistry, 1997 - 23, Che

Glick B., Pasternak J. Taolo ea ts'ebeliso ea mekhoa ea biotechnological // B. Glick, J. Parsnip / Moleki Biotechnology = Molek'hule ea Biotechnology. - M .: Mir, 2002 .-- S. 517-532. - 589 leq.

Glick B., Pasternak J. Molek'hule ea Biology. Melao-motheo le ts'ebeliso. M: Mir, 2002.

Davis R., Botstein D, Roth J. Mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso. Lipale tsa likokoana-hloko // R. Davis, D. Botstein, J. Roth / Per. ho tsoa ho Senyesemane.-M .: Mir. - 1984.— 176 leq.

Ermishin A.P.Likokoana-hloko tse fetotsoeng ka liphatsa tsa lefutso: Nete le Seo e leng 'Nete / A.P. Ermishin // Mn. Tekhnalogaliya.— 2004. - 118 leq.

Lintlha tsa bohlokoa tsa Biotechnology ea Bongaka ba Litlhare: Textbook / TP Prischep, V.S. Chuchalin, K.L. Zaykov, L.K. Mikhaleva. - Rostov-on-Don.: Phoenix, Tomsk: NTL Publishing House, 2006.

Patrushev L.I. Lits'ebetso tsa lefutso tsa maiketsetso. // L.I. Patrushev / M: Nauka.— 2004.

Romanchikov, A.B. Ka tlhaho ho entsoe insulin ea motho. Ho eketsa katleho ea karohano ea chromatographic u sebelisa mohopolo oa bifunctionality. / A.B. Romanchikov le ba bang.

Khemistri ea Bioorganic. 1997. Che. 2. leq. 23

Rybchin V.N. Lihlahisoa tsa mantlha tsa Boenjiniere ba Genetic // V.N. Rybchin / 2nd ed., E ntlafalitsoe. le ho kenyelletsa: Buka ea mangolo bakeng sa liunivesithi. SPb. Ho phatlalatsa ntlo ea SPbSTU. - 2002 .-- 522 s.

Schekunov S. N. Boenjineri ba liphatsa tsa lefutso // Schelkunov S. N. / Novosibirsk: Sib. univ. Ntlo ea phatlalatso.

Schelkunov, S.N. Boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso: lengolo tumello. - 2nd, ed., Tšen. hape eketsa. - Novosibirsk: Sib. univ. Ntlo ea phatlalatso, 2004 .-- 496 leq.

1. Sebaka sa litlamo tse se nang moeli ka har'a molek'hule ea insulin.

2. Litlhophiso tsa masala a amino acid mo molek'huleng ea "insulin"

Matla a insulin ho li-enzyme tsa metabolic tsa bohlokoa

Lithapo tsa "Musip" Adipose tiska e sebetsang 1. Phosphodiesterase 1. Phosphodiesterase 1. LP-lipase

4. Pyruvate dehydrogenase e thata

4. Pyruvate dehydrogenase e thata

5. Phosphatase glycogen synthase le glycogen phosphorylase

5. Glycogen synthase phosphatase b. Induction ea Acetyl-CoA-carboxylase 1. Glucokinase 1. Glyceraldehyde phosphate dehydrogenase

6. Glucose-6-phosphate dehydrogenase Repression Phosphoenolpyruvate carboxykinase

Sa feiga. 3 Morero oa insulin biosynthesis ka li-β-cell tsa lihlekehleke tsa Langerhans. ER - endoplasmic reticulum. 1 - sebopeho sa peptide ea lets'oao, 2 - sebopeho sa preproinsulin, 3 - ho qaptjoa ha peptide ea lets'oao, 4 - ho tsamaisoa ha proinsulin ho lisebelisoa tsa Golgi, 5 - phetoho ea proinsulin ho insulin le C-peptide le ho kenyelletsa insulin le C-peptide ho li-granse tsa sephiri, 6 - insulin le C peptide.

4. Morero o akaretsang oa tšebeliso ea insulin ho tsoa ho bahlahisi ba eona ba pele

Sa feiga. 5 Synthesis ea insulin ka ho theha liketane tse peli tse arohaneng

Mokhoa oa ho fumana insulin ea motho

Moqapi ona o amana le lefapha la biotechnology, haholo molemong oa tlhahiso ea "insulin" e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso bakeng sa ho etsa meriana e sebelisitsoeng kalafo ea lefu la tsoekere.

Mokhoa ona o etsoa ka ho bokella mofuta oa tlhahiso ea protheine e nyalisitsoeng e nang le li-proinsulin tsa motho, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) kapa Escherichia coli JM109 / pPINS07, e sitisa lisele ka ho ikarola, e arola 'mele e kenyang protheine ea hybrid.

Ka mor'a moo, ho hlatsoa pele 'mele ea ho kenyelletsa, ho felisoa ha protheine ka nako e le' ngoe le ho khutlisetsa litlamo tse senyehileng ka har'a buffer e nang le 5-10 mM dithiothreitol le 1 mM EDTA ho etsoa, ​​ho nchafatsoa le ho itlhoekisa ha protheine e hlophisitsoeng ea fusion ka ion exchange chromatography.

Hlakollo ea protheine ea hybrid e etsoa ke hydrolysis e kopaneng ea trypsin le carboxypeptidase B ka tekanyo ea boima ba protheine ea hybrid, trypsin le carboxypeptidase B 4000: 0.6: 0.9.

Ho hloekisoa ha insulin ho etsoa ke hydrophobic chromatography kapa ho khutlisa karolo e kholo ea ts'ebetso e tsoang ka mokelikeli o lateloang ke ho hlohlona ha gel, le ho aroloa hoa insulin ka selikalikoe ka ho ba le letsoai la zinc. Moqapi o lumella ho fokotsa mokhoa oa ho fumana insulin ea motho ka genetically le ho eketsa tlhahiso ea eona.

Moqapi ona o amana le lefapha la biotechnology, haholo molemong oa tlhahiso ea "insulin" e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso bakeng sa ho etsa meriana e sebelisitsoeng kalafo ea lefu la tsoekere.

Ka ho nahana ka katleho ea mantlha ea lefu la tsoekere la sejoale-joale le litlhahiso tsa Mokhatlo oa Lefatše oa Bophelo, linaha tsa Europe ka 2001 li phethela phetoho ea ts'ebeliso ea insulin ea motho. Ntlheng ena, nts'etsopele ea mekhoa ea ho hlahisa insulin e sebelisang mekhoa ea theknoloji ea recombinant ea DNA ke mosebetsi o potlakileng.

Mokhoa o tsejoang oa ho hlahisa li-insulin tsa motho tse hlahisitsoeng ka liphatsa tsa lefutso, o kenyang ho lema mofuta oa molemi E. Coli o hlahisang proinsulin, e nang le tatellano ea likarolo tse peli tse tlamang tsa IgG tsa protheine ea staphylococcal A.

Mokhoa o na le ho senya lisele tsa baktheria, ho fumana Taurus e kenyellelitsoeng e nang le proinsulin, ho qhibilihisa ho kenyelletsa Taurus, oxidative sulfitolysis ea proinsulin, ho nchafatsoa ha eona, ho hloekisoa ha protheine e ntlafalitsoeng ka li-encyme tsa prooperulin (trypsin le carboxypeptidase processation purifure e phahameng le tokiso e phahameng ea ho hloekisa. chromatography (Nilson J., Jonasson P., Samuelsson E., Stahl S., Uhlen M. "Lenaneo le kopantsoeng la insulin ea motho le C-peptide ea eona", Journal of biotechnology, 1996, v. 48, p. 241-250) .

Likotsi tsa mokhoa ona ke litšenyehelo tse phahameng tsa sehlahisoa le ts'ebeliso ea tlhahiso ea "insulin" e ka bang teng sehlahisweni se lebisitsoeng.

Mokhoa o tsejoang oa ho hlahisa li-insulin tsa motho tse hlahisoang ka liphatsa tsa lefutso, o kenyelletsang liseleng tsa moqapi oa mofuta oa E.

Coli DN5 a / pVK100, senya lisele tsa baktheria ka ho phatloha ka matla ka ho ts'oaroa, litopo tse kenyelletsang tse nang le protheine e nyalisitsoeng ho tsoa litšila tse qhibilihang ka metsi ka centrifugation, qhala litopo tse kenang ka har'a buffer e nang le 8 M urea, 1 mM dithiothreitol, 0,1 M Tris-HCl, pH 8,0, bakeng sa lihora tse 12-16.

Litšila tse sa kenngoeng letho li tlosoa ka centrifugation, ka mor'a moo khatello ea dithiothreitol e eketsoa ho 10 mM mme litlamo tsa discride li khutlisoa ka 37 ° C bakeng sa hora e le ngoe. Tharollo e ne e hlapolotsoe ka makhetlo a 5 ka metsi a batang, a fetotsoe ho pH 4.5 mme a kenella lihora tse 2 ho 4 ° C ho theha pula.

The precipitate e nang le protheine e nyalisitsoeng e arotsoe ke centrifugation hape e nchafalitsoe, e qhibilihe kapele ka metsing a batang ho pH ea 10-12, ka mor'a moo e hlapolotsoe ka 10mM glycine buffer, pH 10,8, 'me e bolokoe ka 4 ° C bosiu bo le bong. Kamora ho emisoa ka botlalo, tharollo e ile ea kenngoa ho filtara ea gel kholomong ea Sephadex G-50 'me ea phahama ka buffer ea 10 mM.

Likhechana tse nang le protheine ea fusion lia bokelloa, li be le matla ebe li omisoa. Protheine ea fusion e hlahisoang e qhibilihile ho 0.08 M Tris-HCl buffer, pH 7.5, ho ea ho motsoako oa 10 mg / ml mme e hlakotsoe ka nako e ts'oanang le trypsin le carboxypeptidase B (tekanyo ea carboxypeptidase B: trypsin: fusion proteni 0,3: 1: 10) ho 37 ° C bakeng sa metsotso e 30.

Ebe u eketsa isopropanol ho 40%. Motsoako ona o kopantsoe le kh'outu ea DEAE-Sephadex A-25 mme a natefeloa ka 0.05 M Tris-HCl buffer, pH 7.5 e nang le 40% isopropanol e nang le mela ea methapo ea sodium chloride ho tloha ho 0 ho isa ho 0.1 m. Ka mor'a ho tlosoa ha isopropanol, mahloriso a sodium chloride. nyolohela ho 25%, fetisetsa pH ho 2.0 mme o bokelle insulin precipitate.

(Chen J.Q., Zhang H.T., Hu M.N., Tang J.-G., "Ho hlahisoa ha insulin ea motho tsamaisong ea E. Coli e nang le li-proinsulin tsa met-lys-human joalokaha ho hlalositsoe foreime "E sebelisitse Biochemistry and Biotechnology, 1995, v. 55, leq. 5-15).

Likotsi tsa mokhoa ona li kenyelletsa tšebeliso ea likhoele tsa li-gel maemong a pele, tse hlokang palo e kholo ea sorbent le palo e kholo ea li-enzyme tse sebelisitsoeng ka har'a protheine ea hybrid.

Mokhoa o tsejoang oa ho hlahisa li-insulin tsa motho tse hlahisitsoeng ka liphatsa tsa lefutso, ho kenyelletsa le sehlahisoa sa moetsi oa Escherichia coli JM109 / pPINS07, se senya lisele tsa libaktheria ka ho qhalana, se arola 'mele o kenyelletsang protheine e nyalisitsoeng, o e hlakola ka har'a buffer e nang le urea le dithiothreitol, e nchafatsa le e hloekisang e hloekisitsoeng tlhagiso ea methapo ea litšila ho 40% isopropanol e lateloang ke chromatography ho KM-sepharose, cleavage e latellanang ka trypsin le carboxypeptidase B, ha lihlahisoa li le joalo. trypsinolysis e chromatoto ho SP-Sepharose, e lekantsoe ka 0.03-0.1 M ammonium acetate buffer pH 5.0-6.0 e nang le 6 M urea, e nang le protheine elution ka linear graraent ea sodium chloride ho tloha ho 0 ho isa ho 0.5 M ho qaleng. buffer, le karoloana ea "insulin" e fumanoeng kamora ho qaptjoa ka carboxypeptidase B e ile ea hloekisoa ka ho khutla ha karolo e phahameng ea ts'ebetso e tsoang ka mokokotlo oa metsi (RP HPLC) e lateloang ke filtration ea gel (Pat. RF No. 2141531, MKI C12P 21/02, Publ. 1999)

Litsietsi tsa mokhoa ona li kenyelletsa tšebeliso ea matla a mangata a urea le li-solulin tse teng mohatong oa ho itlhoekisa protheine e nyalisitsoeng.

Setsebi sa lefu la tsoekere

Pele ho ts'ebeliso ea insulin, tebello ea bophelo ba mokuli ea nang le lefu la tsoekere e ne e se lilemo tse fetang 10. Ho qaptjoa ha moriana ona ho pholositse bakuli ba limilione. Insulin ea liphatsa tsa lefutso ea motho ke tsoelo-pele ea morao-rao saenseng.

Liphetho tsa lilemo tse ngata tsa ho sebetsa ka thata

Pele ho qaptjoa hoa tlhophiso ea boenjiniere ba genetic (recombinant), insulin e ne e arotsoe mokhoeng oa likhomo le oa likolobe.

Phapang pakeng tsa insulin ea porcine le motho ke amino acid e le 'ngoe feela

Likotsi tsa mokhoa ona oa ho fumana lithethefatsi:

  • mathata a ho boloka le ho tsamaisa thepa ea tlhaho.
  • khaello ea mehlape
  • mathata a amanang le kabo le tlhoekiso ea li-pancreatic hormone,
  • kotsi e kholo ea karabelo ea mmele.

Ka tšebeliso ea insulin ea tlhaho ea motho ho bioreactor ka 1982, nako e ncha ea biotechnology e qalile. Haeba qalong ea kalafo ea insulin, sepheo sa bo-rasaense e ne e le ho pholoha ha mokuli feela, mehleng ea rona nts'etsopele ea lithethefatsi tse ncha e ikemiselitse ho fumana matšeliso a tšoarellang bakeng sa lefu lena. Morero oa mantlha oa lipatlisiso tsa mahlale ke ho ntlafatsa bophelo ba mokuli ea nang le lefu la tsoekere.

Mahlale a sejoale-joale

Mefuta ea lithethefatsi, ho latela mokhoa oa ho itokisa:

Boenjineri ba liphatsa tsa lefutsoBakeng sa tlhahiso, ho sebelisoa mofuta oa geni o fetotsoeng ka liphatsa tsa lefutso.

  • ho hloka lintho tse ling
  • katleho ea tlhahiso,
  • boemo bo phahameng ba ho itlhoekisa.
Ntho eo u e ratang ka ho fetisisa ea liphatsa tsa lefutso ke E. coli
Ho fetotsoe ka liphatsa tsa lefutsoLintho tse qalang ke insulin ea kolobe. E fetotsoe ka mokhoa oa boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso.Sebopeho sa Hormone
SyntheticSetlhare se entsoeng ka maiketsetso, ka sebopeho sa sona, se tšoana hantle le insulin ea motho.Ho etsa lithethefatsi

Ho etsahalang mmeleng kamora taolo ya lithethefatsi?

Ho hokahana le li-receptor tsa membrane ea sele, insulin e etsa motsoako o kenyeletsang lits'ebetso tse latelang:

  1. E ntlafatsa lipalangoang tsa "glucose" tsa intracellular mme e thusa ho monya.
  2. E khothaletsa tokollo ea li-enzyme tse amehang ts'ebetsong ea tsoekere.
  3. Fokotsa boemo ba glycogen sebopeng.
  4. E susumetsa metabolism ea mafura le protheine.

Tabeng ea tsamaiso ea subcutaneous, insulin e qala ho nka metsotso e 20-25. Nako ea lithethefatsi ho tloha lihora tse 5 ho isa ho tse 8. E hlakisoa hape ke enzyme insulinase 'me e pepesitsoe ka har'a moroto. Setlhare ha se tšele placenta ebile ha se fetele ka lebese la matsoele.

Insulin e hlahisoang ka liphatsa tsa lefutso e laetsoe neng?

Haeba thuso e potlakileng e hlokahala

Ho entsoe ka insulin ea motho ka liphatsa tsa lefutso maemong a latelang:

  1. Type 1 kapa lefu la tsoekere la 2. E sebelisoa e le kalafo e ikemetseng kapa e kopantsoe le lithethefatsi tse ling.
  2. Ka ho hanyetsa li-agent tsa hypoglycemic tsa molomo.
  3. Ka lefu la tsoekere ho basali baimana.
  4. Haeba ho na le mathata a tsoang liphio le sebete.
  5. Ha o fetohela ho insulin ea nako e telele.
  6. Nakong ea ts'ebetso.
  7. Tabeng ea maemo a behang bophelo kotsing (hyperosmolar kapa ketoacidotic coma).
  8. Maemong a tšohanyetso (pele a hlaha, le likotsi).
  9. Haeba ho na le lesapo la letlalo la dystrophic (ulcers, furunculosis).
  10. Phekolo ea lefu la tsoekere khahlano le semelo sa ts'oaetso.

Insulin ea liphatsa tsa lefutso ea motho e mamelletsoe hantle 'me ha e bake mathata, hobane e tšoana hantle le li-hormone tsa tlhaho.

Ho beha leihlo nako le nako ho bohlokoa!

Ha hoa lumelloa ho fana ka meriana haeba:

  • ho theola tsoekere ea mali
  • hypersensitivity ho lithethefatsi.

Matsatsing a pele ka mor'a ho behoa ha moriana, ho hlokahala hore ho be le tlhahlobo e hlokolosi ea mokuli.

Litlamorao

Kotsi ea Urticaria! Edema ea Quincke!

Maemong a sa tloaelehang, ha u sebelisa insulin, ho ka etsahala mathata a latelang:

  • karabelo ea mafu a manganga (urticaria, edema ea Quincke, ho hlohlona ha letlalo),
  • ho fokotseha ho hoholo ha tsoekere ea mali (ho hlaha ka lebaka la ho hana moriana ke 'mele kapa ketsahalong ea likhohlano).
  • ho akheha
  • maemong a matla, kholo ea kholo ea hypoglycemic coma e ka etsahala,
  • lenyora, molomo o ommeng, ho lora, ho felloa ke takatso ea lijo,
  • hyperglycemia (ha u sebelisa lithethefatsi khahlanong le semelo sa tšoaetso kapa feberu),
  • bofubelu ba sefahleho
  • karabelo ea lehae sebakeng sa tsamaiso (ho chesa, ho hlohlona, ​​atrophy kapa ho ata ha mafura a tlotsitsoeng).

Ka linako tse ling ho ikamahanya le lithethefatsi ho tsamaisana le mathata a kang ho ruruha le ho sitisoa hoa pono. Hangata lipontšo tsena lia nyamela kamora libeke tse 'maloa.

U ka fumana insulin ka enjine ea limela joang?

Moriana o fumaneha ka tsela ea tharollo bakeng sa tsamaiso ea batsoali.

"Biosulin"Nako e lekantsoeng ea ketso
ActrapidHo sebetsa ka nakoana insulin
GensulinLitokisetso tsa Biphasic (motsoako oa li-insulin tsa nako e khuts'oane le e bohareng)
RinsulinPhello e potlakileng
HumalogHo sebelisoa pene ea syringe ho tsamaisa moriana.

Ha ho thata ho khetha ho hlophisoa ha insulin ho nahanela litšobotsi tsa mokuli.

Lipehelo tsa ts'ebeliso

Hangata, ho sebelisoa insulin e tsamaisang insulin.

Maemong a potlakileng, moriana o fanoa ka methapo.

Boemong bo boima ba mokuli

Le motho ea nang le lefu la tsoekere ea nang le boiphihlelo a ka etsa phoso ha a sebelisa moriana.

Bakeng sa ho qoba mathata, ho a hlokahala:

  1. Pele o sebelisa, hlahloba hore na moriana o felile hakae.
  2. Tlhokomeliso ea likhakanyo tsa polokelo: Lithollo tsa linoko tse ngata li lokela ho bolokoa sehatsetsing. Vial e tsoetseng pele e ka bolokoa ka mocheso oa kamore sebakeng se lefifi.
  3. Etsa bonnete ba hore o hopola tekanyetso e nepahetseng: bala lengolo la ngaka hape.
  4. Pele ho ente, ho bohlokoa ho lokolla moea ho tsoa syringe.
  5. Letlalo le lokela ho hloeka, empa ho ke ke ho sa ratehe ho sebelisa joala bakeng sa ts'ebetso, hobane e fokotsa ts'ebetso ea lithethefatsi.
  6. Khetha sebaka se setle sa ente. Ha e hlahisoa tlasa letlalo la mpa, sethethefatsi se sebetsa ka potlako. Ho monya insulin hanyane ka hanyane ha e kenngoa mokokotlong kapa mahetleng a gluteal.
  7. Sebelisa sebaka kaofela (thibelo ea mathata a lehae). Sebaka se pakeng tsa liente se lokela ho ba bonyane 2 cm.
  8. Tšoara letlalo ka har'a 'mele ho fokotsa kotsi ea ho kena mesifa.
  9. Kenya ente ka tlasa letlalo ka lehare e le hore mori o se ke oa lutla.
  10. Ha e kenngoa ka mpeng, insulin e nkang nakoana e tšeloa metsotso e 20 pele ho lijo. Tabeng ea khetho ea mahetla kapa marikhoe - metsotso e mashome a mararo pele ho lijo.

Ho kopanya le lithethefatsi tse ling

Hangata ka lefu la tsoekere, mokuli o sebelisa meriana e mengata. Ho kopana le lithethefatsi tse ling ho ka ama phello ea kalafo ea insulin.

Ho thibela mathata, o hloka ho tseba:

Ho eketsa phello ea insulin e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso ka ho theola tsoekere e maling
  • Sulfonamides.
  • MAO inhibitors (furazolidone).
  • ATP inhibitors (Captopril).
  • Motsoako o seng khahlanong le ho ruruha (diclofenac, aspirin).
  • Androgens.
  • Lithethefatsi tsa Antimalarial (quinidine).
  • Li-steroid tsa anabolic.
  • Lithibela-mafu tsa Tetracycline (doxycycline).
  • Theophylline.
  • Morphine.
Setlhare se tsebahalang se sebelisoang kalafo ea ts'oaetso ea mofets'e oa urinary Doxycycline
Fokotsa ts'ebetso ea insulin
  • Glucocorticoids (prednisone, hydrocortisone).
  • Estrogen e nang le lithibela-pelehi tsa molomo.
  • Diuretics
  • Amphetamines.
  • Lihomone tsa qoqotho.
  • Sympathomimetics (adrenaline, mesatone, dopamine).
  • Glucagon.
Mamela ka hloko!

Bongata

Maemong a mang, tsamaiso ea insulin e lebisa ho fokotseha ha tsoekere ea mali ka tšohanyetso. Hangata bothata bo hlaha ka lebaka la khetho e fosahetseng ea litekanyetso.

Matšoao a pele a hypoglycemia:

  • bofokoli
  • pallor ea letlalo
  • boemo ba matšoenyeho
  • ho tsekela
  • pherekano
  • letsoalo la matsoho, maoto, leleme le molomo,
  • maoto le matsoho
  • mofufutso o batang
  • maikutlo a matla a tlala
  • hlooho e bohloko.

Tremor; ho senyeha ka tšohanyetso boiketlong

Haeba u hlokomela matšoao ana, u lokela ho potlakela ho ja ntho e nang le lik'habohaedreite tse bonolo tse jang lijo. E ka ba li-cookies, lipompong, sengoathoana sa tsoekere kapa bohobe bo tšoeu. Tee e monate e thusa maemong a joalo.

Haeba boemo bo mpefala, o lokela ho letsetsa ambulense. Hypoglycemia e ka fella ka ho akheha kapa ho shoa ha mokuli.

Na ho na le insulin hape?

Lumela Insulin e kopanyang ha e tšoane le ea tlhaho. Ho e fumana, ho sebelisoa libaktheria tse fetotsoeng liphatsa tsa lefutso.

U sebelisa theknoloji ea boenjiniere ea liphatsa tsa lefutso, DNA e kopanyang e nang le gene ea insulin e kentsoe seleng ea E. coli. Likokoana-hloko tse fetotsoeng ka liphatsa tsa lefutso li ata ebile li hlahisa lihormone. Setlhare se sebetsa hantle haholo ebile se na le tekanyo e phahameng ea tlhoekiso.

Insulin Karolo ea Bobeli Tlhahiso ea "insulin" ea Microbiological

Karolo ea tumellano - e nolofalletsa haholo ho aroloa ha protheine e nyalisitsoeng.

Maemong ana, likarolo tsena ka bobeli li ka ba teng ka nako e ts'oanang sebopeho sa protheine e nyalisitsoeng.

Ntle le moo, ha ho theha liprotheine tse nyane tsa "hybrid", moeli oa ts'ebeliso ea multidimensionality o ka sebelisoa (ke hore, likopi tse 'maloa tsa polypeptide e fumanehang li teng ka har'a protheine ea hybrid), e ka eketsang haholo tlhahiso ea sehlahisoa se lebisitsoeng.

2 Khopolo ea proinsulin liseleng tsa E. coli ..

Mosebetsing, bangoli ba sebelisitse mofuta oa JM 109 N1864 ka tatellano ea nucleotide e kentsoeng ka har'a plasmid e hlahisang protheine e nyalisitsoeng, e nang le proinsulin e nang le mela le sekhechana sa protheine ea Staphylococcus aureus e hokahantsoeng le N-terminus ea eona ka masala a methionine.

Ho lengoa ha mefuta e felletseng ea lisele tsa "recombinant" ho fana ka qalo ea tlhahiso ea protheine e nyalisitsoeng, ho itšehla thajana le phetoho e latellanang eo tube e lebisang ho insulin.

Sehlopha se seng sa bafuputsi se amohetse protheine e kopantsoeng tsamaisong ea libaktheria e kopantsoeng le proinsulin ea motho le mohatla oa polyhistidine o kopantsoeng le ona ka masala a methionine. E ne e qheletsoe ka thoko e sebelisa chlate chromatography likholomong tsa Ni-agarose ho tsoa mebele e kenyellelitsoeng mme e entsoe ka cyanogen bromide.

Ho etsa limmapa le tlhahlobo ea bongata ba litšoantšo tsa proinsulin e fumanoeng e hloekisitsoeng ke ion exchange chromatography ka phapanyetsano ea anion le RP (phase revers) HPLC (high performance fluid chromatography) e bontšitse ho ba teng ha marokho a arohaneng a tsamaellanang le ho koala marokho a proinsulin ea tlhaho. Pampiri e tlaleha ka nts'etsopele ea mokhoa o mocha, o ntlafalitsoeng oa ho hlahisa insulin ea motho ka boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso liseleng tsa prokaryotic. Bangoli ba fumane hore insulin e hlahisitsoeng ka sebopeho sa eona le ts'ebetso ea bioloji e ts'oana le hormone e arohaneng le manyeme.

Haufinyane, ho se ho shebiloe tlhokomelo e haufi-ufi ho nolofatsa mokhoa oa ho hlahisa insulin e kopantsoeng ke boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso. Kahoo, bangoli ba fumane protheine ea fusion e nang le peptide ea pele ea 2 ea interleukin 2 e khomaretsoeng N-terminus ea proinsulin ka masala a lysine.

Protheine e ile ea hlahisoa ka nepo le ho tsebahala libakeng tsa 'mele e kenyelelitsoeng. Kamora ho ikhetholla, protheine e ile ea kenngoa ka trypsin ho hlahisa insulin le C-peptide. Sehlopha se seng sa bafuputsi se ile sa etsa se tšoanang.

Protheine ea fusion e kenyang proinsulin le likarolo tse peli tsa maiketsetso tsa staphylococcus A protheine e tlamang IgG e ne e fumaneha libakeng tsa 'mele ea ho kenyeletsoa, ​​empa e ne e na le polelo e phahameng. Protheine e ile ea qheleloa ka thoko ke "chromatography" ea tumellano e sebelisang IgG mme e sebetsoa ka trypsin le carboxypeptidase B.

Insulin e hlahisitsoeng le C-peptide e ile ea hloekisoa ke RP HPLC. Ha u theha likarolo tse hlophisitsoeng, boholo ba protheine e tsamaisang le polypeptide e bohlokoa haholo.

Kahoo, mosebetsi o hlalosa kaho ea meaho ea fusion, moo protheine e kopanyang serum albin e sebelisitsoeng e le polypeptide e tsamaisang. E le 'ngoe, tse tharo le tse supileng tsa li-peptide li ne li hokelletsoe ho eona.

C-peptides li ne li hokahane motheong oa mohatla o sebelisang li-spacers tsa amino acid tse nkileng sebaka sa thibelo ea Sfi I le masalla a mabeli a arginine qalong le qetellong ea spacer bakeng sa karohano ea liprotheine tse latellanang ka trypsin. HPLC ea lihlahisoa tsa cleavage e bonts'itse hore khoele ea C-peptide e ngata, mme sena se lumella ts'ebeliso ea mefuta ea maiketsetso ea multimeric ho fumana polypeptides e lebelletsoeng setsing sa indasteri.

Mosebetsi o hlalosa ho hlophisoa ha proinsulin mutant, e neng e e-na le Arg32Tyr. Ha protheine ena e kopantsoe le trypsin le carboxypeptidase B, insulin ea tlhaho le C-peptide e tšetseng masala a tyrosine e ile ea thehoa. E qetellang, ka mor'a ho ngola 125I, e sebelisoa ka mafolofolo ho radioimmunoassay. 3 Ho hloekisa insulin.

Insulin e reretsoeng ho etsa lithethefatsi e tlameha ho ba ea bohloeki bo phahameng. Ka hona, taolo e sebetsang haholo ea bohloeki ba lihlahisoa tse fumanoang mohatong ka mong oa tlhahiso e ea hlokahala. Pele ho moo, RP le IO (ion exchange) HPLC e ne e sebelisoa ho supa li-proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, motho ka mong oa A- le B-liketane, le S-sulfonates ea bona.

Tlhokomelo e khethehileng e boetse e lefelloa ho tsoa ho fluorescent insulin. Mosebetsing, bangoli ba ile ba etsa lipatlisiso ka ho sebetsa le ho ba le tsebo ea mekhoa ea chromatographic tlhahlobisong ea lihlahisoa maemong ohle a tlhahiso ea insulin ea motho mme ba etsa lethathamo la ts'ebetso ea chromatographic ho arola le ho tšoaea lihlahisoa tse hlahisoang.

Ntle le moo, mekhoa e ntse e etsoa ho iketsetsa le ho potlakisa lits'ebetso tsa ho khetholla bohloeki le bongata ba insulin.

Pampiri e tlaleha ka lipatlisiso tsa monyetla oa ho sebelisa chPatatography ea metsi ea RP ka ho lekola ka matla bakeng sa insulin, le mokhoa oa ho fumana qeto ea insulin e arotsoeng sehlekehlekeng sa Langerhans ka immunoaffinity chromatography e nang le tlhahlobo ea pono ea mahlaseli a kotsi.

Mosebetsing, monyetla oa ho sebelisa qeto e potlakileng ea insulin o sebelisa capillary electrophoresis e fumanoeng ke laser-fluorescence e ile ea hlahlojoa. Tlhahlobo ena e etsoa ka ho eketsa sampole palo e tsejoang ea insulin e ngotsoeng le phenylisothiocyanate (FITC) le sekhechana sa Fab sa monoclonal insulin antibodies. E ngotsoe kahare ebile e sebelisoa ka mehla li-insulin ka tlholisano li sebetsana le Fab tata. FITZ-e ngotsoe ka insulin mme e rarahaneng le Fab e arotsoe ka metsotsoana e 30.

Haufinyane, palo e kholo ea mesebetsi e nehetsoe ntlafatsong ea mekhoa ea ho hlahisa insulin, hammoho le ho theha liforomo tsa litekanyetso li thehiloe ho eona.

Mohlala, naheng ea USA, li-analog tsa hepatospecific insulin li patiloe, li hlophisitsoe ka sebopeho se fapaneng le li-hormone tsa tlhaho ka lebaka la kenyelletso ea masala a fapaneng a amino acid maemong a 13 le a 19 a ketane ea A le maemong a 16 a ketane ea B.

Li-analogues tse fumanoeng li sebelisoa ka har'a li-parenteral (intravenous, intramuscular, subcutaneous), liforomo tsa methapo ea methapo kapa ho kenngoa ka mokhoa oa li-capsules tse khethehileng kalafong ea lefu la tsoekere. Bohlokoa ka ho khetheha ke ho theha liforomo tsa litekanyetso li fanoang ntle le ente.

Pampiri e tlaleha ka ho qaptjoa ha tsamaiso ea molomo ea macromolecular, e leng insulin e sa ts'oaneng le bophahamo ba polymer hydrogel e fetotsoeng le li-inhibitors tsa protein. Bokhabane ba sethethefatsi se joalo ke 70-80% ea katleho ea ts'ebetso ea "insulin" ea tlhaho ka tlhaho.

Mosebetsing o mong, lithethefatsi li fumanoa ka insulin ea mohato o le mong le lisele tse khubelu tsa mali, tse nkuoeng ka karolelano ea 1-4: 100, ka pel'a moemeli ea tlamang.Bangoli ba tlaleha ho amoheloa ha moriana o nang le ts'ebetso ea li-unit tsa 1000 / g, polokeho e felletseng ea ts'ebetso kamora ho tsamaisoa ka molomo le ho bolokoa ka lilemo tse 'maloa ka foromo ea lyophilized.

Ntle le ho theha mefuta e mecha ea lithethefatsi le litekanyetso ho latela insulin, mekhoa e mecha e ntse e etsoa ho rarolla bothata ba lefu la tsoekere.

Kahoo, bangoli ba ne ba fetisetsa protheine ea "gluutose" transporter protheine cDNA pele e neng e fetisoa ka mokhoa o hlakileng ka li-insulin cDNA tse lekaneng tsa lisele tsa HEP G2 ins.

Ho li-clones tse fumanoeng tsa HEP G2 Insgl, tsoekere e hlohlelletsa haufi le secretion e tloaelehileng ea insulin mme e ka arabela karabo ea sephiri ho tse hlohlelletsang tse ling tsa secretion.

Immunoelectron microscopy e ile ea senola li-insulin tse nang le insulin ka morpholo ka mokhoa o ts'oanang le granules tse li-cell tsa li-b tsa lihlekehleke tsa Langerhans. Monyetla oa ho sebelisa "cell-b-cell" o fumanoeng ke mekhoa ea boenjiniere bakeng sa kalafo ea lefu la tsoekere la mellitus 1 o ntse o qoqoa ka botebo.

Hammoho le ho rarolla mathata a sebetsang, mekhoa ea ts'ebetso ea insulin, hammoho le likamano tsa sebopeho le tšebetso molek'huleng, lia ithutoa. E 'ngoe ea mekhoa ea ho etsa lipatlisiso ke ho theha mefuta e fapa-fapaneng ea "insulin" le tlhahlobo ea thepa ea bona ea "" physicochemical and immunological "23, 24.

Joalokaha ho boletsoe kaholimo, mekhoa e mengata ea ho etsa insulin e thehiloe ho iphumanele lihormone ka sebopeho sa projulin (proinsulin), se lateloang ke enzymatic cleavage ho insulin le C-peptide. Hajoale, boteng ba ts'ebetso ea bioloji bo bontšitsoe bakeng sa C-peptide, e etsang hore e khone ho e sebelisa molemong oa kalafo hammoho le insulin.

Lihloohong tse latelang tsa letoto lena, ho tla nahanoa ka likarolo tsa mmele le tsa tlhaho tsa C-peptide, hammoho le mekhoa ea ho e lokisa.

Biotechnology ha ho etsoa lithethefatsi

Ho khahlisang ke ntšetso-pele ea ho fumana mofuta oa 20K oa STGh. Mosebetsi o ts'episang ke ho fumana le ho ithuta eseng feela mefuta e fapaneng ea STH, empa le STH e nang le bokhoni ba ho fumana ts'ebetso ea nako e telele ea lihormone. Mokhoa oa mantlha o qapiloe bakeng sa ho fumana STHch e sa tsitsang ka ketso ea nako e telele.

Tumellanong le tlhahiso ea STH, theknoloji e kopaneng ea mantlha bakeng sa tlhahiso ea lihormone tsa adenohypophysis, ho kenyeletsoa mefuta eohle e ikhethileng, le tse ling tsa liphetoho tsa tsona ho GST li entsoe. Ntho ea bohlokoa haholo ke ts'ebetso ea lenaneo le reretsoeng ho theha mofuta oa litlhare oa kalafo (STHATES) se fumanoang ke boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso.

Phihlelo ea bongaka e bonts'itse hore, ho ntlafatsa ts'ebetso ea ho ts'oha, ho bohlokoa ho ba le pokellong ea lihlahisoa tse fapaneng tsa meriana tse fumanoeng ke mahlale a fapaneng kapa mekhoa (MF, Ausomatin, Somatogen).

Phekolo ea nako e telele (bakeng sa lilemo) ka tokiso e le 'ngoe ea HSCH e baka ho fokotseha hoa kutloisiso ho eona' meleng.

Karolong e ngoe, sena e kanna ea ba sesosa sa ho thehoa ha li-antibodies, empa lebaka le ka sehloohong le lokela ho batloa ho boemo ba li-receptor le ho sebetsa ha hormone.

Sebetsa le GST, hammoho le lithuto tse phethahetseng tsa li-hormone tse patiloeng le mefuta ea tsona e fapaneng e etsa hore ho khonehe ho ithuta lits'ebetso tse entsoeng ke tlhaho le ho li utloisisa haholoanyane. Ho ba teng ha mefuta e fapaneng ea matsoalloa a STH 'meleng ho bontša ho ba bonolo le tšebeliso ea bona, mohlala, tleleniking.

Ha u theha litokisetso tse ncha tsa STHch, ho hlokahala hore pele ho tsohle ho shejoe mefuta ea tlhaho ea lihormone, 'me haeba ho loketse, e tla li lekanya ka boenjineri ba liphatsa tsa lefutso, joalo ka ha ho etsoa le monontsha oa STHch.

Tlhahisong ea litokisetso tsa STHch tse tsoang GST, theknoloji e felletseng ea indasteri bakeng sa tlhahiso ea lihormone tse ling tsa adenohypophysis (LGH, FSHch, TTGch le tse ling) e kenngwa tšebetsong. Hoa hlokahala ho ntlafatsa tlhahiso ka ho hlahisa mekhoa e mecha e tsoetseng pele (chustatography ea tumellano, jj.

) amohela li-hormone tse hloekileng haholo u sebelisa theknoloji e kopaneng.

Ho hlokahala hore ho atolosoe tlhahiso le tšebeliso ea li-immunomicroanalysis tsa lihormone tsa adenohypophysis bakeng sa tlhahlobo le biotechnology, ho etsa tlhahiso e laoloang ea li-antibodies tse emeng tsa likala tse fapaneng, ho theha litokisetso tse ncha tsa STHch, ho kenyelletsa le tse sa sebetseng.

Taba ea hore STH e ama protheine, mafura le liminerale tsa liminerale, e sebetsa ka har'a sele ntle le karolo ea sepheo, 'me e le anabolic, e fana ka tebello e kholo ea ts'ebeliso ea eona ho susumetsa mekhoa ea ho lokisa le ho phekola mafu a fapaneng. Boithuto bo pharalletseng ba litaba tsena, hammoho le monyetla oa ho sebelisa mefuta e fapaneng e fetotsoeng le tse fapaneng tsa STGch, ke mosebetsi o potlakileng le o tšepisang.

Ho fumana insulin ho "biotechnology"

Insulin, e leng hormone ea peptide ea lihlekehleke tsa Langerhans tsa manyeme, ke kalafo e ka sehloohong bakeng sa lefu la tsoekere. Lefu lena le bakoa ke khaello ea insulin mme le bonahatsoa ke keketseho ea tsoekere ea mali. Ho fihlela haufinyane tjena, insulin e ile ea fumanoa mokhoeng oa poho le oa kolobe.

Lithethefatsi li ne li fapana le insulin ea motho ka li-amino acid tse 1-3, hoo ho neng ho na le ts'oso ea ho haptjoa ke lintho tse ling, haholoholo baneng. Tšebeliso e pharaletseng ea kalafo ea insulin e ne e sithabetsoa ke litšenyehelo tsa eona tse phahameng le tse fokolang.

Ka phetoho ea lik'hemik'hale, insulin e tsoang liphoofolong e entsoe ka mokhoa o fapaneng le motho, empa sena se ne se bolela ho nyoloha ha theko ea sehlahisoa.

Ho tloha ka 1982, EliLilly o ntse a hlahisa insulin ka enjene e thehiloeng mohloling o ikhethileng oa liketane tsa E. coli A le B. Litsenyehelo tsa sehlahisoa li fokotsehile haholo, insulin e hlahisitsoeng e tšoana hantle le ea motho. Ho tloha ka 1980, ho bile le litlaleho mecheng ea litaba mabapi le ho qaptjoa ha mofuta oa proinsulin, e leng kemiso ea li-hormone e fetolang mofuta o holileng o nang le protheine e lekanyelitsoeng.

Theknoloji ea Encapsulation e boetse e sebelisoa kalafo ea lefu la tsoekere: lisele tsa pancreatic ka har'a sephutheloana, tse kenngoeng hang ka 'mele oa mokuli, li hlahisa insulin nakong ea selemo.

Genetics e Kopaneng e hlahisitse lihormone tse matlafatsang le tse matlafatsang. Li-peptide tsena li entsoe ka subunits tse peli. Lenaneong ke mofuta oa liindasteri oa oligopeptide lihormone tsa tsamaiso ea methapo - enkephalins, e hahiloeng ho tloha litsong tse 5 tsa amino acid, le endorphin, analogues ea morphine.

Ha li sebelisoa ka mokhoa oa rallyally, li-peptide tsena li imolla bohloko, li ba le moea o motle, li eketsa katleho, li tsepamisa mohopolo, li ntlafatsa mohopolo ebe li robala hantle le ho robala.

Mohlala oa ts'ebeliso e atlehileng ea mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso ke mokhoa oa p-endorphin o sebelisang theknoloji ea protheine ea hybrid e hlalositsoeng ka holimo bakeng sa hormone e ngoe ea peptide, somatostatin.

Mekhoa ea ho hlahisa insulin ea motho:

Ho latela nalane, mokhoa oa pele oa ho fumana insulin bakeng sa kalafo ke ho aroloa hoa li-hormone tsa tlhaho tse tsoang mehloling ea tlhaho (li-isanc tsa manyeme a likhomo le likolobe).

Lilemong tsa bo-20 tsa lekholong la ho qetela la lilemo, ho ile ha fumaneha hore li-insulin tsa "bovine le" (tse haufi haholo le insulin ea motho ka sebopeho le tatellano ea amino acid) li bonts'a ts'ebetso ea 'mele oa motho ho bapisoa le insulin ea motho. Kamora moo, ho ne ho sebelisoa insulin ea poho kapa ea kolobe bakeng sa kalafo ea bakuli ba nang le lefu la tsoekere la mofuta oa.

Leha ho le joalo, kamora nako e itseng ho ile ha bontšoa hore maemong a mang li-antibodies tsa ho bovine le "insulin" insulin li qala ho bokellana 'meleng oa motho, ka ho etsa joalo li sa natse phello ea tsona.

Ka lehlakoreng le leng, e 'ngoe ea melemo ea mokhoa ona oa ho fumana insulin ke ho fumaneha ha lihlahisoa tse tala (bovine le pork insulin li ka fumaneha habonolo ka bongata bo bongata), e ileng ea bapala karolo ea bohlokoa ho nts'etsopele ea mokhoa oa pele oa ho hlahisa insulin ea motho.Mokhoa ona o bitsoa semi-synthetic.

Ka mokhoa ona oa ho hlahisa insulin ea motho, insulin ea "pig" e sebelisitsoe e le sejo sa phepo. C-terminal octapeptide ea ketane ea B e ile ea hlakoloa ho tsoa ho insulin e hloekisitsoeng ea motsoako, ka mor'a moo, C-terminal octapeptide ea insulin ea motho e ile ea etsoa.

Ebe e kenngoa ka lik'hemik'hale, lihlopha tse sirelletsang li tlosoa 'me insulin e ileng ea latela e ile ea hloekisoa. Ha ho hlahlojoa mokhoa ona oa ho fumana insulin, ho ile ha bontšoa boitsebiso bo phethahetseng ba 'mele bo fumanoeng ho insulin ea motho.

Bothata bo ka sehloohong ba mokhoa ona ke litšenyehelo tse phahameng tsa insulin e teng (esita le hona joale, motsoako oa lik'hemik'hale oa octapeptide ke thabo e turang, haholoholo sekhethong sa indasteri).

Hajoale insulin ea motho e fumaneha haholo ka mekhoa e 'meli: ka ho fetoloa ha insulin ka mokhoa oa enzymatic le mokhoa oa boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso.

Khetlong la pele, mokhoa o thehiloe ho taba ea hore insulin ea "pig" e fapana le insulin ea motho sebakeng se le seng ho C-terminus ea ketane ea Ala30Thr B.

Ho nkeloa alanine ka threonine ho etsoa ke enzyme-catalyzed cleavage ea alanine le tlatsetso ea masala a threonine a sirelelitsoeng ke sehlopha sa carboxy sebakeng sa eona, se teng ka tekanyo e kholo ho motsoako oa karabelo. Kamora ho qaqisa sehlopha sa ts'ireletso sa O-tert-butyl, insulin ea motho ea fumanoa.

Insulin ke proteni ea pele e fumanoeng molemong oa khoebo e sebelisang theknoloji ea DNA ea recombinant. Ho na le mekhoa e 'meli e ka sehloohong ea ho hlahisa insulin ea motho.

Khetlong la pele, ho aroloa (likarolo tse fapaneng tsa baetsi ba lihlahisoa) bakeng sa liketane ka bobeli tse lateloang ke ho peta molek'hule (ho etsoa ha marokho a arohaneng) le karohano ea isoforms.

Khetlong la bobeli, tlhahiso ka sebopeho sa precursor (proinsulin) e lateloang ke tšilo ea enzymatic ka trypsin le carboxypeptidase B ho mofuta o sebetsang oa lihormone.

Hajoale, ho molemo ka ho fetisisa ho fumana insulin ka sebopeho sa morusu, e netefatsang ho koaloa ka mokhoa o nepahetseng oa marokho a sa senyeheng (maemong a ho hlophisoa ka thoko ha liketane, ho latellana hoa potoloho ea kemiso, karohano ea isoforms le ho nchafatsoa hape hoa etsoa).

Ka mekhoa ena ka bobeli, ho ka etsahala ka bobeli ho fumana likarolo tsa ho qala (A- le B-liketane kapa proinsulin), hape joalo ka karolo ea liprotheine tse nyalisitsoeng. Ntle le ketane ea A le B kapa proinsulin, liprotheine tse nyalisitsoeng li ka ba le:

1) protheine e tsamaisang - e fana ka liprotheine tsa "hybrid" sebakeng se potolohileng seleng kapa moetlong,

2) Karolo ea tumellano - e nolofalletsa haholo ho aroloa ha protheine e nyalisitsoeng.

Maemong ana, likarolo tsena ka bobeli li ka ba teng ka nako e ts'oanang sebopeho sa protheine e nyalisitsoeng. Ntle le moo, ha ho theha liprotheine tse nyane tsa "hybrid", moeli oa ts'ebeliso ea multidimensionality o ka sebelisoa (ke hore, likopi tse 'maloa tsa polypeptide e fumanehang li teng ka har'a protheine ea hybrid), e ka eketsang haholo tlhahiso ea sehlahisoa se lebisitsoeng.

Khopolo ea proinsulin liseleng tsa E. coli ..

Strain JM 109 N1864 ka tatellano ea nucleotide e hlalosang protheine ea fusion, e nang le protheine ea methapo le protheine ea Staphylococcus aureus sekhechana se khomaretsoeng N-terminus ea eona ka masala a methionine, se sebelisitsoe mosebetsing.

Ho lengoa ha mefuta e felletseng ea lisele tsa "recombinant" ho fana ka qalo ea tlhahiso ea protheine e nyalisitsoeng, ho itšehla thajana le phetoho e latellanang eo tube e lebisang ho insulin.

Sehlopha se seng sa bafuputsi se amohetse protheine e kopantsoeng tsamaisong ea libaktheria e kopantsoeng le proinsulin ea motho le mohatla oa polyhistidine o kopantsoeng le ona ka masala a methionine. E ne e qheletsoe ka thoko e sebelisa chlate chromatography likholomong tsa Ni-agarose ho tsoa mebele e kenyellelitsoeng mme e entsoe ka cyanogen bromide.

Ho etsa limmapa le tlhahlobo ea bongata ba litšoantšo tsa proinsulin e fumanoeng e hloekisitsoeng ke ion exchange chromatography ka phapanyetsano ea anion le RP (phase revers) HPLC (high performance fluid chromatography) e bontšitse ho ba teng ha marokho a arohaneng a tsamaellanang le ho koala marokho a proinsulin ea tlhaho. Ho boetse ho tlalehoa ka nts'etsopele ea mokhoa o mocha, o ntlafalitsoeng oa ho hlahisa insulin ea motho ka boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso liseleng tsa prokaryotic. Bangoli ba fumane hore insulin e hlahisitsoeng ka sebopeho sa eona le ts'ebetso ea bioloji e ts'oana le hormone e arohaneng le manyeme.

Haufinyane, ho se ho shebiloe tlhokomelo e haufi-ufi ho nolofatsa mokhoa oa ho hlahisa insulin e kopantsoeng ke boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso. Kahoo, protheine ea fusion e ile ea fumanoa e e-na le peptide ea pele ea li-interleukin e khomaretsoeng N-terminus ea proinsulin ka masala a lysine. Protheine e ile ea hlahisoa ka nepo le ho tsebahala libakeng tsa 'mele e kenyelelitsoeng.

Kamora ho ikhetholla, protheine e ile ea kenngoa ka trypsin ho hlahisa insulin le C-peptide. Sehlopha se seng sa bafuputsi se ile sa etsa se tšoanang. Protheine ea fusion e kenyang proinsulin le likarolo tse peli tsa maiketsetso tsa staphylococcus A protheine e tlamang IgG e ne e fumaneha libakeng tsa 'mele ea ho kenyeletsoa, ​​empa e ne e na le polelo e phahameng.

Protheine e ile ea qheleloa ka thoko ke li-chromatography tsa IgG mme e anngoe ka trypsin le carboxypeptidase B. Ho hlahisang insulin le C-peptide ho ile ha hloekisoa ke RP HPLC. Ha u theha likarolo tse hlophisitsoeng, boholo ba protheine e tsamaisang le polypeptide e bohlokoa haholo.

Ho hahoa ha liforomo ho hlalositsoe moo protheine ea motho ea serum albin e sebelisoang e le polypeptide e tsamaisang. E le 'ngoe, tse tharo le tse supileng tsa li-peptide li ne li hokelletsoe ho eona.

C-peptides li ne li hokahane motheong oa mohatla o sebelisang li-spacers tsa amino acid tse nkileng sebaka sa thibelo ea Sfi I le masalla a mabeli a arginine qalong le qetellong ea spacer bakeng sa karohano ea liprotheine tse latellanang ka trypsin. HPLC ea lihlahisoa tsa cleavage e bonts'itse hore khoele ea C-peptide e ngata, mme sena se lumella ts'ebeliso ea mefuta ea maiketsetso ea multimeric ho fumana polypeptides e lebelletsoeng setsing sa indasteri.

Ho fumana proinsulin e feto-fetohang, e neng e e-na le Arg32Tyr. Ha protheine ena e kopantsoe le trypsin le carboxypeptidase B, insulin ea tlhaho le C-peptide e tšetseng masala a tyrosine e ile ea thehoa. E qetellang, ka mor'a ho ngola 125I, e sebelisoa ka mafolofolo ho radioimmunoassay.

Insulin e reretsoeng ho etsa lithethefatsi e tlameha ho ba ea bohloeki bo phahameng. Ka hona, taolo e sebetsang haholo ea bohloeki ba lihlahisoa tse fumanoang mohatong ka mong oa tlhahiso e ea hlokahala. Pele ho moo, RP le IO (ion exchange) HPLC e ne e sebelisoa ho supa li-proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, motho ka mong oa A- le B-liketane, le S-sulfonates ea bona.

Tlhokomelo e khethehileng e boetse e lefelloa ho tsoa ho fluorescent insulin. Mosebetsing, bangoli ba ile ba etsa lipatlisiso ka ho sebetsa le ho ba le tsebo ea mekhoa ea chromatographic tlhahlobisong ea lihlahisoa maemong ohle a tlhahiso ea insulin ea motho mme ba etsa lethathamo la ts'ebetso ea chromatographic ho arola le ho tšoaea lihlahisoa tse hlahisoang.

Ntle le moo, mekhoa e ntse e etsoa ho iketsetsa le ho potlakisa lits'ebetso tsa ho khetholla bohloeki le bongata ba insulin.

Boithuto mabapi le monyetla oa ho sebelisa chate ea metsi ea RP e nang le tlhahlobo ea electrochemical ho fumana insulin li tlalehiloe, mme mokhoa oa ho khetholla insulin o arotsoeng ke Langerhans islet ke immunoaffinity chromatography e nang le tlhahlobo ea pono ea mahlaseli a kotsi.

Mosebetsing, monyetla oa ho sebelisa qeto e potlakileng ea insulin o sebelisa capillary electrophoresis e fumanoeng ke laser-fluorescence e ile ea hlahlojoa.Tlhahlobo ena e etsoa ka ho eketsa sampole palo e tsejoang ea insulin e ngotsoeng le phenylisothiocyanate (FITC) le sekhechana sa Fab sa monoclonal insulin antibodies. E ngotsoe kahare ebile e sebelisoa ka mehla li-insulin ka tlholisano li sebetsana le Fab tata. FITZ-e ngotsoe ka insulin mme e rarahaneng le Fab e arotsoe ka metsotsoana e 30.

Insulin ea boenjiniere ea genetic

Potso ea hore na insulin e entsoe ka eng ha e khahlise lingaka feela le litsebi tsa meriana, empa le ho bakuli ba nang le lefu la tsoekere, hammoho le ba habo bona le metsoalle.

Kajeno, hormone ena e ikhethang ebile e bohlokoa haholo bakeng sa bophelo bo botle ba motho e ka fumaneha lihlahisoa tse fapaneng tsa lihlahisoa tse sebelisang mahlale a ntlafalitsoeng ka hloko le ka hloko. Ho latela mokhoa oa ho itokisetsa, mefuta e latelang ea "insulin" e khetholloa:

  • Kolobe kapa bovine, eo hape e bitsoang sehlahisoa sa phoofolo
  • Kolobe e fetotsoeng ea biosynthetic e fetotsoe
  • Re entsoe ka liphatsa tsa lefutso kapa re li kopanya
  • Ho fetotsoe ka liphatsa tsa lefutso
  • Synthetic

Insulin ea nama ea kolobe e sebelisitsoe nako e telele ho feta lefu la tsoekere. Ts'ebeliso ea eona e qalile morao koana lilemong tsa bo-20 tsa lekholo le fetileng la lilemo.

Re lokela ho hlokomela hore nama ea kolobe kapa phoofolo e ne e le eona feela lithethefatsi ho fihlela lilemong tsa bo-80 tsa lekholong la ho qetela. Ho e fumana, ho sebelisoa lithane tsa pancreas ea liphoofolo.

Leha ho le joalo, mokhoa ona o ke ke oa bitsoa o nepahetseng kapa o bonolo: ho sebetsa ka lihlahisoa tse tala tsa tlhaho ha ho bonolo kamehla, 'me thepa e tala ka boeona ha ea lekana.

Ntle le moo, sebopeho sa porcine insulin ha se tsamaisane ka botlalo le sebopeho sa hormone se hlahisoang ke motho ea phetseng hantle: masala a fapaneng a amino acid a teng ka sebopeho sa ona. Ho lokela ho hlokomeloe hore lihormone tse hlahisoang ke makhopho a likhomo li na le phapang e kholo le ho feta, e ke keng ea bitsoa ntho e ntle.

Ka boitokiso bo joalo, ho tlatselletsa ho ntho e hloekileng ea multicomponent, se bitsoang proinsulin se na le thepa e sa ts'oaneng, ntho e ke keng ea aroloa ho sebelisoa mekhoa ea sejoaletso ea tlhoekiso. Ke eena ea atisang ho fetoha lintho tse kulang, tse kotsi ka ho khetheha ho bana le ho batho ba baholo.

Makhoba a meriana a boetse a batla ho kenya chelete ho batho ba nang le lefu la tsoekere. Ho na le moriana oa sejoale-joale oa Europe, empa ba lula ba khutsitse ka hona. Seo.

Ka lebaka lena, bo-rasaense lefatšeng ka bophara ba 'nile ba labalabela ho tlisa sebopeho sa li-hormone tse hlahisoang ke liphoofolo tumellanong e felletseng ea li-hormone tsa pancreatic tsa motho ea phetseng hantle. Phallo ea 'nete lefapheng la meriana le kalafo ea lefu la tsoekere ke tlhahiso ea sethethefatsi se entsoeng ka halofo e fumanoeng ka ho nkela amino acid alanine tokisetsong ea liphoofolo le threonine.

Ka nako e ts'oanang, mokhoa oa maiketsetso oa ho hlahisa li-hormone o thehiloe ts'ebelisong ea litokisetso tsa liphoofolo. Ka mantsoe a mang, ba fetoloa le ho tšoana le lihormone tse hlahisitsoeng ke batho. E 'ngoe ea melemo ea bona ke ho tsamaisana le' mele oa motho le ho se ts'oane le lintho tse ling tse amang mmele.

Likotsi tsa mokhoa ona li kenyelletsa khaello ea lisebelisoa tse tala le bothata ba ho sebetsa ka lisebelisoa tsa tlhaho, hammoho le litšenyehelo tse phahameng tsa theknoloji ka boeona le sethethefatsi se hlahisoang.

Ntlheng ena, lithethefatsi tse ntle ka ho fetisisa bakeng sa kalafo ea lefu la tsoekere ke insulin hape e fumanoang ke boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso.

Ka tsela, hangata e bitsoa insulin ea liphatsa tsa lefutso, ka hona e bonts'a mokhoa oa ho e fumana, 'me sehlahisoa se hlahang se bitsoa insulin ea motho, ka hona se hatisa boitsebahatso ba eona bo phethahetseng ba lihormone tse hlahisoang ke manyeme a motho ea phetseng hantle.

Har'a melemo ea insulin ea boenjiniere ea genetic, motho o boetse o lokela ho hlokomela bohloeki ba eona bo phahameng le ho haella ha proinsulin, hammoho le taba ea hore ha e bake karabelo leha e le efe e kulang mme ha e na li-contraindication.

Potso e botsoang khafetsa ea utloahala: Hantle-ntle insulin e entsoe ka eng? Ha e le hantle, hormone ena e hlahisoa ke tomoso, hammoho le Escherichia coli, e kentsoeng ka har'a semela se khethehileng sa phepo. Ho feta moo, palo ea ntho e fumanoeng e kholo haholo hoo ho ka khonehang ho tlohela ka botlalo ts'ebeliso ea lithethefatsi tse fumanoeng ho litho tsa liphoofolo.

Ehlile, hona ha se taba ea E. coli e bonolo, empa mabapi le gene e fetotsoeng 'me e khona ho hlahisa insulin e entsoeng ka tlhaho bakeng sa liphatsa tsa lefutso, sebopeho le thepa ea sona e ts'oanang hantle joalo ka hormone e hlahisoang ke lisele tsa manyeme a motho ea phetseng hantle.

Melemo ea "insulin engineering" ea inshorense ha e tšoane ka ho felletseng le li-hormone tsa motho, empa hape le boiketlo ba ho itukisetsa, bongata bo lekaneng ba lihlahisoa tse tala le theko e theko e tlase.

Bo-rasaense ho potoloha lefatše ba bitsa tlhahiso ea "insulin" e kopantsoeng hape e le phetoho ea 'nete kalafong ea lefu la tsoekere. Bohlokoa ba ho sibolloa hona bo boholo ebile bo bohlokoa hoo ho leng thata ho bo tseba.

Ho bonolo hore re hlokomele hore kajeno hoo e batlang e le 95% ea tlhoko ea hormone ena e khotsofatsoa ka thuso ea insulin.

Ka nako e ts'oanang, batho ba likete ba neng ba e-na le tahi ea lithethefatsi ba ile ba fumana monyetla oa bophelo bo tloaelehileng.

Ke bile le lefu la tsoekere ka lilemo tse 31. Hona joale o phetse hantle. Empa, li-capsules tsena ha li khonehe ho batho ba tloaelehileng, ha ba batle ho rekisa li-pharmacies, ha ho na thuso bakeng sa bona.

Insulin ea boenjiniere ea motho e sebetsa joang

Molemong oa kalafo ea mofuta oa 1 lefu la tsoekere, ho sebelisoa insulin ea methapo ea motho ea methapo e 'meli. Lifekthering, e rekisoa ka tsela ea tharollo 'me e na le letšoao "O Ratehile". Mofuta oa bobeli oa lefu o ka alafshoa ka sethethefatsi se joalo haeba meriana e boletsoeng e sa lokele lefu la tsoekere.

Insulin e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso e boetse e sebelisoa ha motho a e-na le lefu la tsoekere. Hangata lingaka li fana ka ente ho basali ba bakhachane ba fumanoeng ba tšoeroe ke lefu la tsoekere ha lipilisi tse fokotsang tsoekere le mokhoa oa ho ja o sa sebetseng.

Ka kakaretso, li-insulin kapa li-GMO li entsoe ka liphatsa tsa lefutso li sebelisoa nakong ea tlhaho ea ngoana, ha a buuoa kapa a le tsoekere e lemetse haholo. Setlhare se u lumella ho fetohela ka mokhoa o sireletsehileng ts'ebeliso ea lihormone tse sebetsang ka potlako.

  1. Pele o sebelisa enjene ea tlhaho ea setho sa insulin, ho bohlokoa ho etsa tlhahlobo le ho fumana hore na moriana ona o loketse mokuli. Haeba lefu la tsoekere le senola hypoglycemia, tšebeliso ea lithethefatsi ha e khothalletsoe.
  2. Morero oa ts'ebetso ea tharollo ke hore insulin e kenelletseng ka liphatsa tsa lefutso e sebetsana le lisele, e lebisang ho hlahisoeng ha likarolo. Ha lisele li kena litsing tsena, lia hlohlelletsoa 'me li qala ho sebetsa ka mafolofolo haholoanyane. Ka lebaka leo, ho hlahisoa li-enzyme tse ling.
  3. Ts'ebetsong, tsoekere e kenngoa ka potlako, lik'habohaedreite tse kenang 'meleng li sebetsoa ka mafolofolo. Kahoo, sebete se hlahisa tsoekere e telele, 'me liprotheine li ka ananeloa kapele.

Molao-motheo oa ts'ebetso ea moriana o itšetlehile ka tekanyetso, mofuta oa insulin, khetho ea sebaka sa ente. Ts'ebetso efe kapa efe e lokela ho etsoa feela ka mor'a tumellano le ngaka e eang. Liente tsa pele li etsoa tlas'a tlhokomelo ea bongaka.

Malebela mabapi le ts'ebeliso ea moriana

Joaloka boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso tsa insulin kapa insulin e na le mabitso a fapaneng a khoebo. Hape lihormone li ka fapana ha nako e etsoa, ​​mokhoa oa ho lokisa tharollo. Lihlahisoa li rehiloe ho latela mofuta oa insulin.

Li-insulin tse entsoeng ka liphatsa tsa lefutso ke karolo ea meriana e kang Humudar, Vozulim, Actrapid. Insuran, Gensulin. Sena ha se lenane le felletseng la lithethefatsi tse joalo, palo ea tsona e kholo haholo.

Litlhare tsohle tse kaholimo li fapana ho latela 'mele.Li-GMO li ka qeta lihora tse ngata kapa tsa ba mafolofolo bakeng sa matsatsi ohle.

Lithethefatsi tsa mekhahlelo e 'meli li kenyelletsa lithethefatsi tse kenyelletsang likarolo tse itseng tse fetolang nako ea ho pepesetsoa sethethefatsi.

  • Lithethefatsi tse joalo li rekisoa ka mokhoa oa metsoako, ho kenyelletsa le lihormone tse fumanoeng liphatsa tsa tsona tsa lefutso.
  • Lichelete tsena li kenyelletsa Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
  • Lithethefatsi li sebelisoa habeli ka letsatsi, halofo ea hora pele ho lijo. Sistimi e joalo e lokela ho lateloa ka tieo, hobane li-hormone li amana ka kotloloho le nako ea lijo.

Ka tlhahiso ea insulin ea motho, ho fumanoa boitokisetso bo nang le nako ea ho pepeseha.

  1. Tharollo e qala ho sebetsa nakong ea metsotso e 60, empa motsotso oa ts'ebetso e phahameng ka ho fetisisa e bonoa lihora tse tšeletseng ho isa ho tse supileng kamora ho kenngoa.
  2. Setlhare se tlosoa ka botlalo 'meleng ka mor'a lihora tse 12.
  3. Lithethefatsi tse joalo li kenyelletsa Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Ho boetse ho na le li-GMO tse nang le nako e khuts'oane ea ho pepeseha 'mele. Tsena li kenyelletsa meriana Insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Li-insulin tse joalo li na le karolo e sebetsang ka mor'a lihora tse peli ho isa ho tse tharo, 'me matšoao a pele a ketso ea moriana a ka bonoa nakong ea halofo ea hora kamora ente.

Pele insulin e fanoa, li-GMO li hloka ho hlahlojoa hore na li pepeneneng le ho se be teng ha lintho tse tsoang ka ntle ho mokelikeli. Haeba ho fumanoe lintho tse tsoang ka ntle ho moriana, moferefere kapa pula e hlaha, vial e lokela ho lahloa - moriana ha o loketse ho sebelisoa.

Insulin e sebelisitsoeng e tlameha ho ba ka mocheso oa kamore. Litekanyetso tsa li-hormone li lokela ho lokisoa haeba lefu la tsoekere le na le lefu le tšoaetsanoang, ho se sebetse ha qoqotho, lefu la Addison, hypopituitarism le lefu la liphio le sa foleng.

Litlhaselo tsa hypoglycemia li ka etsahala ka lithethefatsi tse ngata, maemong a phetoho ea mofuta o mocha oa insulin, ka lebaka la ho ja lijo tse matla kapa ho ikoetlisa ka ho feteletseng. Hape phoso e ka ba mafu a fokotsang tlhoko ea hormone - tekanyo e matla ea lefu la liphio, lefu la sebete, fokotseha ea qoqotho, adrenal cortex, le gland ea pituitary.

  1. Ho fokotseha ho matla ha tsoekere ea mali hoa khoneha ka phetoho sebakeng sa ente. Ka hona, ho hlokahala hore o fetole mofuta o mong oa insulin ka mokhoa o loketseng mme feela kamora tumellano le ngaka e eang.
  2. Haeba lefu la tsoekere le sebelisa insulin e nkang nakoana, ka linako tse ling bophahamo ba litekanyetso tsa adipose bo fokotseha sebakeng sa ente kapa, ka lehlakoreng le leng, sea eketseha. Ho thibela sena, ente e lokela ho etsoa libakeng tse fapaneng.

Basali ba baimana ba lokela ho tseba hore litlhoko tsa insulin li ka fapana nakong ea bokhachane ba bokhachane. Ho etsa sena, o hloka ho etsa tlhahlobo ea tsoekere ea mali ea letsatsi le letsatsi ka glucometer.

Ketso ea insulin 'meleng oa motho e hlalosoa ka mokhoa o qaqileng videong ena.

1. Sebopeho le mesebetsi ea insulin 5

1.1. Sebopeho sa molek'hule ea "insulin"

1.2. Bohlokoa ba tlhaho ea insulin 7

1.3. Insulin Biosynthesis 8

2. Ho tsoaka liphatsa tsa lefutso tsa genetic 10

2.1. Tšebeliso ea mekhoa ea boenjiniere ea liphatsa tsa lefutso bakeng sa litlhare tsa 10

2.2. Mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso 11

2.3. Tlhahiso ea tlhahiso ea "insulin" ea tlhaho

Qeto 18

Matšoao a overdose

Ha u sebelisa insulin, ho bohlokoa ho latela litlhahiso tsa ngaka le ho boloka tekanyo e nepahetseng ea moriana o boletsoeng.

Maemong a ho se latele melao le ts'oaetso e feteletseng, lefu la tsoekere le qala ho ba le hlooho e bohloko, mahlaba, tlala, ho fufuleloa, sekhahla sa pelo, motho o fetoha mosebetsi o boima, o halefileng. Ho utloahala ho utloisa bohloko hohle 'meleng le ho thothomela.

Matšoao a joalo a tšoana hantle le matšoao a ho fokotseha ha tsoekere ea mali.Ka mohato o bobebe oa matšoao, lefu la tsoekere le ka rarolla bothata ka bo lona le ho ntlafatsa boemo. Ho etsa sena, ja pompong kapa sehlahisoa leha e le sefe se monate se nang le tsoekere.

  • Haeba ho ba le lefu la tsoekere le hlaha, ba sebelisa tharollo ea dextrose, moriana o tšeloa ka sekhahla ho fihlela motho a hlaphohetsoe. Ka lipontšo tsa pele tse belaetsang, ho hlokahala ho letsetsa ambulense, e tla tseba ho tsosetsa mokuli mekhoa ea maemo a tšohanyetso.
  • Litla-morao kamorao ho tšebeliso ea li-GMO, motho o na le lekhopho letlalong ka mokhoa oa urticaria, likarolo tsa 'mele li ruruha, khatello ea mali e theoha haholo, ho hlohlona le ho hema ka thata ho ka hlaha. Ena ke karabelo ea mefuta eohle ea lithethefatsi, eo ka mor'a nakoana e ka nyolohang e le ngoe ntle le ts'ebetso ea bongaka. Haeba maemo a ntse a tsoela pele, o lokela ho bona ngaka ea hau.
  • Matsatsing a pele a ho itukisetsa insulin, hangata batho ba nang le lefu la tsoekere ba omella 'mele, motho o na le ho haelloa ke mokelikeli, takatso ea lijo e mpefala, ho ruruha matsohong le maotong ho hlaha,' me ho otsela ho sa feleng. Matšoao a joalo a tsamaea kapele 'me a se ke a hlola a khutla.

Litlhahlobo le maikutlo

Ke na le lefu la tsoekere la mofuta oa 2 - motho eo e seng insulin. Motsoalle o ile a eletsa ho theola tsoekere ea mali le DiabeNot. Ke odara ka inthanete. O ile a qala ho amohela.

Ke latela lijo tse seng thata, hoseng ho hong le ho hong ke ne ke qala ho tsamaea lik'hilomithara tse 2-3 ka maoto. Libekeng tse peli tse fetileng, ke hlokometse ho fokotseha ha tsoekere ho limithara hoseng pele ho lijo tsa hoseng ho tloha ho 9,3 ho isa ho 7.1, esita le ho isa ho 6 maobane.

1! Ke tsoelapele ka tsela ea thibelo. Ke tla ngola ka katleho.

Margarita Pavlovna, le nna ke lutse ho Diabenot hona joale. SD 2. Ha ke hlile ha ke na nako ea ho ja le ho tsamaea, empa ha ke sebelise lisepa le lik'habohaedreite, ke nahana hore XE, empa ka lebaka la lilemo, tsoekere e ntse e phahame.

Liphetho ha li tšoane le ea hau, empa tsoekere e 7.0 ha e tsoe beke. U lekanya tsoekere le gluceter efe? Na o u bontša plasma kapa mali a felletseng? Ke batla ho bapisa sephetho sa ho sebelisa litlhare.

Ke leboha haholo ka poso e joalo e nang le tsebo.

Tlhahiso ea inshorense ea liphatsa tsa lefutso

Ho etsa hore motho a ikutloe a phetse hantle, o hloka ho lekola boemo ba insulin 'meleng. Hormone ena e lokela ho lekana hore tsoekere e se ke ea bokellana maling. Ho seng joalo, haeba ho na le mathata a metabolic, ngaka e hlahloba lefu la tsoekere.

Pheko bakeng sa sethala se tsoetseng pele sa lefu la tsoekere ke ho etsa hore insulin e se ke ea hlahisoa ke 'mele ka tlhaho. Bakeng sa sena, ho sebelisoa insulin e qhibilihang, e tšoanang le enjene ea motho. Makhophane a ikarabella bakeng sa tlhahiso ea lihormone tse joalo.

Bakeng sa tlhahiso ea insulin, ha ho sebelisoe theknoloji ea ho hlahisa lihormone tsa tlhaho feela, baetsi ba tsona ba sebelisa insulin e fetotsoeng ka mokhoa oa theknoloji. Setlhare se tšoailoeng "solubilis" se bontšoa e le qhibilihang.

Mefuta ea lithethefatsi

Joaloka boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso tsa insulin kapa insulin e na le mabitso a fapaneng a khoebo. Hape lihormone li ka fapana ha nako e etsoa, ​​mokhoa oa ho lokisa tharollo. Lihlahisoa li rehiloe ho latela mofuta oa insulin.

Li-insulin tse entsoeng ka liphatsa tsa lefutso ke karolo ea meriana e kang Humudar, Vozulim, Actrapid. Insuran, Gensulin. Sena ha se lenane le felletseng la lithethefatsi tse joalo, palo ea tsona e kholo haholo.

Litlhare tsohle tse kaholimo li fapana ho latela 'mele. Li-GMO li ka qeta lihora tse ngata kapa tsa ba mafolofolo bakeng sa matsatsi ohle.

Lithethefatsi tsa mekhahlelo e 'meli li kenyelletsa lithethefatsi tse kenyelletsang likarolo tse itseng tse fetolang nako ea ho pepesetsoa sethethefatsi.

  • Lithethefatsi tse joalo li rekisoa ka mokhoa oa metsoako, ho kenyelletsa le lihormone tse fumanoeng liphatsa tsa tsona tsa lefutso.
  • Lichelete tsena li kenyelletsa Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
  • Lithethefatsi li sebelisoa habeli ka letsatsi, halofo ea hora pele ho lijo. Sistimi e joalo e lokela ho lateloa ka tieo, hobane li-hormone li amana ka kotloloho le nako ea lijo.

Ka tlhahiso ea insulin ea motho, ho fumanoa boitokisetso bo nang le nako ea ho pepeseha.

  1. Tharollo e qala ho sebetsa nakong ea metsotso e 60, empa motsotso oa ts'ebetso e phahameng ka ho fetisisa e bonoa lihora tse tšeletseng ho isa ho tse supileng kamora ho kenngoa.
  2. Setlhare se tlosoa ka botlalo 'meleng ka mor'a lihora tse 12.
  3. Lithethefatsi tse joalo li kenyelletsa Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Ho boetse ho na le li-GMO tse nang le nako e khuts'oane ea ho pepeseha 'mele. Tsena li kenyelletsa meriana Insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Li-insulin tse joalo li na le karolo e sebetsang ka mor'a lihora tse peli ho isa ho tse tharo, 'me matšoao a pele a ketso ea moriana a ka bonoa nakong ea halofo ea hora kamora ente.

Lithethefatsi tse joalo li tlosoa ka mor'a lihora tse tšeletseng.

Ts'ebeliso ea insulin e qhibilihang ka popelong ea motho e etselitsoeng lefu la tsoekere

Insulin e entsoeng ka liphatsa tsa motho ke mofuta o tloaelehileng oa hormone bakeng sa insulin e hlahisang makhopho.

Ha ho sebelisoe feela lihomone tsa motho tse fetotsoeng liphatsa tsa lefutso bakeng sa synthesis, empa hape le ntho e entsoeng ka maiketsetso. Khetho e 'ngoe e tsebahalang ea ho theha sethethefatsi sena ke ts'ebeliso ea "insulin" e fetotsoeng

ka sebopeho le mesebetsi ea eona, e haufi haholo le motho.

Lenaneo la tlhahiso ea insulin ea boenjiniere.

Matšoao le contraindication

Insulin e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso e ka sebelisoa bakeng sa mofuta oa 1 lefu la tsoekere le lefu la tsoekere la 2, ha karabelo e tsitsitseng ea lithethefatsi tsa molomo tse nang le mofuta oa hypoglycemic e bonoa.

E ka sebelisoa ha mokuli a le mefuta e meng ea ho akheha. Haeba mosali oa moimana a sa tsoa qala ho ba le lefu la tsoekere, joale ts'ebeliso ea insulin ea boenjiniere e lumelloa, empa feela ha lijo li sa thusa ho ama maemo a tsoekere. Ts'ebeliso ea eona e khothalletsoa maemong a ts'oaetso a nang le tšoaetso moo hyperthermia e ka bonoang.

Litokisetso tsa genene lia atleha ts'ebelisong ea bona nakong ea tlhaho ea ngoana, ts'ebetso, likotsi, mathata a metabolic le maemong a fetohang butle ho insulin ka ketso e telele.

Ho thibetsoe ho sebelisa litokisetso tsa gene ho khutlisetsa li-hormone ka hypersensitivity ho likarolo tse itseng tsa lithethefatsi le hypoglycemia.

Ketso ea pharmacological ea lithethefatsi

Lithethefatsi tsa mofuta ona li sebetsana le li-receptor tse itseng tsa lebota, li etsa li-complex le tsona. Ha e kena ka liseleng, ho rarahana ha moriana ho ama mosebetsi, ho o thusa hore o sebetse haholoanyane le ho hlahisa li-enzyme tse ling.

Tekanyo ea tsoekere e theoha ka lebaka la hore e sebetsoa ka potlako ke lisele. Kamora moo, ts'ebetso ea lipogenesis, tlhahiso ea liprotheine e potlakile mme lebelo la sebete ho thehoa ha glucose le fokotsehile.

Nako ea lithethefatsi e tla ipapisa le sebaka sa ente, mofuta oa lithethefatsi, litekanyetso le karabelo ea motho ka mong. Ke ngaka feela e ka thehang litekanyetso le ho fana ka litlhare tse itseng sehlopheng sena. Nakong ea pele ea ho sebelisa lithethefatsi, mokuli o beoa leihlo haholo ke lingaka ho bona hore na moriana o lahloa.

Mehlala ea Mefuta ea Li-insulin ea Enjene ea liphatsa tsa lefutso

Insulin e entsoeng ka tlhaho ea motho e fumaneha lithethefatsing tse tsebahalang tse kang Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin le tse ling.

Ho na le mefuta e fapaneng ea insulin.E 'ngoe ea lipapatso e bua ka hore na moriana o na le nako e kae. Ho ea ka eena, insulin e qhibilihang e ka ba le khato e khuts'oane le e telele. Ho na le lithethefatsi tse kopaneng (biphasic insulin), e nang le ntho ea ts'ebetso e potlakileng le e telele.

Mofuta ona oa meriana o bitsoa motsoako. Har'a tsona, ho na le tse bōpiloeng ka phetoho ea li-hormone tsa motho. Li-insulin tsa mekhahlelo e 'meli ke Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin le Gensulin. Li hloka ho sebelisoa habeli ka letsatsi, halofo ea hora pele ho lijo.

Sena se bakoa ke taba ea hore insulin ea mekhahlelo e 'meli e na le ntho e nkang nako e khuts'oane, e leng eona takatso ea lijo.

Analogue ea boenjiniere ea lihormone tsa motho ke har'a lithethefatsi tse nang le nako e telele. Insulin ena e qhibilihang e qala ho sebetsa kamora hora, mme tlhoro ea ts'ebetso ea eona e etsahala kamora lihora tse 7. Kamora lihora tse 12, e ea bontšoa. Sesebelisoa sa tlhaho sa motho se entsoeng ka liphatsa tsa lefutso ke Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran.

Ho na le moriana o entsoeng ka liphatsa tsa lefutso oa motho har'a sehlopha o nkile khato e khuts'oane. Mohlala, tsena li kenyelletsa Gansulin, Insuran, Humulin, Rinsulin, Gensulin, Bioinsulin le Actrapid. Insulin e joalo e qhibilihang e qala ho sebetsa ka nako ea halofo ea hora, 'me ts'ebetso ea eona e fihla maemong a eona a phahameng ka mor'a lihora tse' maloa. Lithethefatsi tse joalo li qholotsoa lihora tse 6.

Haeba ho na le lithethefatsi tse ngata tse nang le insulin e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso, bofokoli, ho otsela, ho teneha, ho teneha, ho fokotseha ha mofufutso o batang, ho thothomela, pallor, palpitations, hlooho, hlooho le tlala e ka ba teng. Tsena tsohle ke matšoao a hypoglycemia.

Haeba lefu lena le sa tsoa qala ho ba le lona mme le le maemong a lona a pele, a bonolo, joale o ka tlosa matšoao ohle ka boeena. Ho etsa sena, o hloka ho ja lijo tse nang le tsoekere le tse nang le lik'habohaedreite tse ngata, tse ka chejoang habonolo. Tharollo ea glucagon le dextrose li ka hlahisoa 'meleng.

Haeba motho a oele ka har'a komello, joale o hloka ho kenya tharollo ea dextrose e fetotsoeng ho fihlela boemo bo ntlafala.

Batho ba bang ba ka ba le karabelo e itseng ho latela lithethefatsi tse fetotsoeng liphatsa tsa lefutso ka insulin. Matšoao a ka kenyelletsa likhahla, ho ruruha, ho felloa ke matla, khatello e tlase ea mali, ho hema hanyane, ho ruruha, feberu le ho hlohlona.

Maemong a mang, ho hlaha hypoglycemia le komello. Mathata le kelello ea motho esita le ho akheha ho ka hlaha. Haeba mokuli a haelloa ke meriana, a ka ba le hyperglycemia.

E hlaha ka lebaka la litekanyetso tse tlase tsa pele, le nts'etsopele ea liketsahalo tse tšoaetsang 'meleng, hape le haeba u sa khomarele melao ea lijo.

Maemong a mang, mokuli a ka ba le lipodystrophy libakeng tseo ho sebelisoang lithethefatsi ho tsona.

Qalong ea ts'ebeliso ea lithethefatsi, ho hlohlona, ​​ho hloka metsi, ho otsela le takatso ea lijo li ka hlaha. Empa liketsahalo tsena ke tsa nakoana.

Tšebeliso ea motsoako bakeng sa insulin ea tlhaho, joalo ka ntho e entsoeng ka liphatsa tsa lefutso, ke tlatsetso e ntle haholo kalafong ea lefu la tsoekere.

E thusa ho fokotsa sekhahla sa tsoekere ka lebaka la hore tsoekere e monya haholo ke lisele, le lits'ebetso tsa phetoho ea eona. Empa meriana ena e hloka ho sebelisoa ka thata ho latela taelo ea ngaka, hobane

li ka baka litlamorao tse sa batleheng tsa bophelo bo botle ho mokuli.

Insulin e etsoa ka eng?

Insulin ke moriana o ka sehloohong oa kalafo ea lefu la tsoekere la mofuta oa 1. Ka linako tse ling e boetse e sebelisetsoa ho tsitsisa mokuli le ho ntlafatsa boiketlo ba hae ka mofuta oa bobeli oa bokuli. Ntho ena ka tlhaho ea eona ke hormone e khonang ho ama metabolism ea carbohydrate ho litekanyetso tse nyane.

Ka tloaelo, manyeme a hlahisa insulin e lekaneng, e thusang ho boloka tsoekere ea mali e le hantle. Empa ka mathata a tebileng a endocrine, monyetla feela oa ho thusa mokuli hangata ke ente ea insulin hantle.

Ka bomalimabe, ho ke ke ha khoneha ho e nka ka molomo (ka mokhoa oa matlapa), hobane e senngoe ka botlalo sethaleng sa tšilo mme e lahleheloa ke boleng ba eona ba tlhaho.

Litokisetso tse fumanoang lihlahisoa tse tala tsa tlhaho ea liphoofolo

Ho fumana lihormone ho tsoa makhophong a likolobe le likhomo ke theknoloji ea khale e seng e sa sebelisoe haholo kajeno.

Sena se bakoa ke boleng bo tlase ba moriana o amohetseng, tšekamelo ea ona ea ho baka mafu le ho hlatsuoa ka mokhoa o sa lekanang.

Taba ke hore kaha lihormone ke ntho ea protheine, e na le karolo e itseng ea li-amino acid.

Insulin e hlahisoang 'meleng oa kolobe e fapana ka sebopeho sa amino acid ho tsoa ho insulin ea motho ka 1 amino acid, le 3 ea insulin.

Qalong le bohareng ba lekholo la bo20 la lilemo, ha lithethefatsi tse tšoanang li ne li le sieo, esita le insulin e joalo e ne e le phetoho ea bongaka mme e lumelletse ho nka kalafo ea batho ba lefu la tsoekere ho ba isa maemong a macha. Lihormone tse fumanoeng ke mokhoa ona li fokotsa tsoekere ea mali, leha ho le joalo, hangata li ne li baka litla-morao.

Liphapang mabapi le sebopeho sa li-amino acid le litšila tse ling tsa lithethefatsi li amme boemo ba bakuli, haholo-holo maemong a tlokotsing a bakuli (bana le maqheku).

Lebaka le leng la ho se mamelle insulin e joalo ke ho ba teng ha eona e sa sebetseng kahare ho moriana (proinsulin), o neng o sa khone ho tlosa phapusing ena ea lithethefatsi.

Matsatsing ana, ho na le li-insulin tse tsoetseng pele tsa nama ea nama ea nama ea nama ea kolobe ntle le mefokolo ena. Li fumanoa ho tsoa matšoaong a kolobe, empa kamora moo li kenngoe ts'ebetsong le tlhoekiso e eketsehileng. Li na le lintho tse ngata tse fapaneng, 'me li na le likheo tsa tsona.

Insulin e fetotsoeng nama ea kolobe ha e tšoane le lihormone tsa motho, ka hona e ntse e sebelisoa le ho ikoetlisa

Lithethefatsi tse joalo li lumelloa ke bakuli hamolemo mme ha li bake litšitiso, ha li thibele sesole sa 'mele mme li fokotsa tsoekere ea mali ka katleho. Bovine insulin ha e sebelisoe ho tsa bongaka kajeno, hobane ka lebaka la sebopeho sa eona sa kantle ho naha e ama hampe tsamaiso ea 'mele ea ho itšireletsa mafung le' mele oa motho.

Insulin Boreli

Insulin ea motho, e sebelisetsoang batho ba nang le lefu la tsoekere, molemong oa indasteri e fumanoa ka litsela tse peli:

Maemo a ho boloka insulin

  • U sebelisa kalafo ea enzymatic ea porcine insulin,
  • sebelisa mefuta e fetotsoeng liphatsa tsa lefutso ea Escherichia coli kapa tomoso.

Ka phetoho ea lik'hemik'hale tsa physico, limolek'hule tsa porcine insulin tlasa ts'ebetso ea li-enzyme tse khethehileng li tšoana le insulin ea motho. Karolo ea amino acid e litokisetso tse etsahalang ha e tšoane le sebopeho sa lihimo tsa tlhaho tse hlahisoang 'meleng oa motho.

Nakong ea ts'ebetso ea tlhahiso, moriana o itlhoekisa haholo, ka hona ha e bake lintho tse bohloko kapa lipontšo tse ling tse sa rateheng.

Empa khafetsa, insulin e fumanoa e sebelisoa ka li-microorganisms tse fetotsoeng (liphatsa tsa lefutso). U sebelisa mekhoa ea biotechnological, baktheria kapa tomoso e fetoloa ka tsela eo ka eona e ka hlahisang insulin.

Ntle le tlhahiso ea insulin ka boeona, tlhoekiso ea eona e bapala karolo ea bohlokoa. E le hore sethethefatsi se se ke sa baka karabelo leha e le efe ea ho kula le ho ruruha, sethaleng ka seng ho hlokahala hore ho be le ho hloeka ha litšila tsa likokoana-hloko le tharollo tsohle, hammoho le metsoako e sebelisitsoeng.

Ho na le mekhoa e 'meli bakeng sa tlhahiso ea insulin. Ya pele ho tsona e thehiloe ts'ebelisong ea mefuta e 'meli e fapaneng ea "mofuta" oa "microorganism" e le' ngoe.

E 'ngoe le e' ngoe ea tsona e kopanya ketane e le 'ngoe ea molek'hule ea DNA ea li-hormone (ho na le tse peli feela tsa tsona,' me li hokahantsoe hammoho).

Ebe liketane tsena li hokahane, 'me tharollong e hlahisitsoeng e se e khona ho arola mefuta e sebetsang ea insulin ho tse sa jereng bohlokoa ba tlhaho.

Mokhoa oa bobeli oa ho fumana moriana o sebelisa Escherichia coli kapa tomoso e thehiloe holima taba ea hore Microbe pele e hlahisa insulin e sa sebetseng (ka mantsoe a mang, proinsulin ea eona ke proinsulin). Ebe, ka ho sebelisa kalafo ea enzymatic, foromo ena e sebetsa 'me e sebelisoa ho tsa bongaka.

Basebetsi ba nang le phihlello ea lits'ebeletso tse ling tsa tlhahiso ba tlameha ho apesoa sutu e sa itšireletsang e felisang ho kopana ha sethethefatsi ka maro a tlhaho a motho.

Ts'ebetso tsena kaofela li etsoa ka boiketsetso, moea le libaka tsohle tse hokahaneng le li-ampoules le li-vials li hloekile, 'me mela e nang le lisebelisoa e tiisitsoe ka mokhoa o makatsang.

Mekhoa ea biotechnology e thusa bo-rasaense ho nahana ka tharollo e 'ngoe ea lefu la tsoekere.

Mohlala, ho fihlela joale, lithuto tsa pele tsa ho etsoa ha lisele tsa maiketsetso tsa pancreatic beta li ntse li etsoa, ​​tse ka fumanoang ka mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso.

Mohlomong nakong e tlang li tla sebelisoa ho ntlafatsa ts'ebetso ea setho sena ho motho ea kulang.

Ho hlahisoa ha litokisetso tsa insulin tsa morao-rao ke ts'ebetso e rarahaneng ea theknoloji e kenyeletsang boits'oaro le ho kenella ha batho hanyane

Lintho tse ling

Ho hlahisoa ha insulin ntle le li-excipients lefats'eng la kajeno ho batla ho le thata ho nahana, hobane ba ka ntlafatsa thepa ea eona ea lik'hemik'hale, ba atolosa nako ea ts'ebetso le ho fihlela bohloeki bo phahameng.

Ka thepa ea bona, lisebelisoa tsohle tse ling li ka aroloa ka lihlopha tse latelang:

  • li-prolongators (lintho tse sebelisetsoang ho fana ka tšebeliso e telele ea lithethefatsi),
  • dikarolo tsa sebolaya-mafu
  • ba tsitsitseng, ka lebaka leo acidity e nepahetseng e bolokiloeng tharollong ea lithethefatsi.

Ho eketsa nako

Ho na le li-insulin tse sebetsang nako e telele tseo mosebetsi oa tsona oa tlhaho o tsoalang lihora tse 8 ho isa ho tse 42 (ho latela sehlopha sa moriana). Phello ena e fihlella ka lebaka la kenyelletso ea lintho tse khethehileng - li-prolongator tharollo ea ente. Hangata, e 'ngoe ea likhomphutha tse latelang e sebelisetsoa morero ona:

Liprotheine tse eketsang ts'ebetso ea lithethefatsi li hloekisoa ka botlalo mme li na le allergenic e tlase (mohlala, protamine). Letsoai la Zinc le lona ha le ame mosebetsi o mongata oa insulin kapa ho phela hantle ha motho.

Lithibela-mafu ka sebopeho sa insulin lia hlokahala e le hore limela tse sa bonahaleng li se ke tsa ngatafala nakong ea polokelo le tšebeliso ho eona. Lintho tsena ke lintho tse bolokang matla le ho netefatsa polokeho ea tšebetso ea tlhaho ea sethethefatsi.

Ntle le moo, haeba mokuli a tsamaisa lihormone ho tloha ho vial e le 'ngoe feela ho eena, moriana o ka nka matsatsi a' maloa.

Ka lebaka la likarolo tsa boleng bo phahameng ba antibacterial, a ke ke a ba le tlhoko ea ho lahla sethethefatsi se sa sebelisoeng ka lebaka la monyetla oa ho ikatisa ka tharollo ea likokoana-hloko.

Lintho tse latelang li ka sebelisoa e le lithibela-mafu tlhahisong ea insulin:

Haeba tharollo e na le li-ion tsa zinc, li sebetsa hape e le setlhare se bolokiloeng ka lebaka la thepa ea bona ea antimicrobial

Bakeng sa tlhahiso ea mofuta o mong le o mong oa insulin, likarolo tse ling tsa sesole li loketse. Tšebelisano ea bona le lihormone e tlameha ho hlahlojoa sethaleng sa liteko tsa tlhahlobo ea pele, hobane setlokotsebe ha sea lokela ho senya ts'ebetso ea biulin ea insulin kapa ka tsela e mpe e ama thepa ea eona.

Ts'ebeliso ea litlhare maemong a mangata e lumella lihormone ho tsamaisoa tlasa letlalo ntle le kalafo ea pele ka joala kapa li-antiseptics tse ling (hangata moetsi o bua ka sena ho latela litaelo).

Sena se nolofalletsa tsamaiso ea lithethefatsi le ho fokotsa palo ea litokiso pele ho ente ka boeona.

Empa tlhahiso ena e sebetsa feela haeba tharollo e fanoa ho sebelisoa sindano ea insulin e le ngoe ka nale e tšesaane.

Ba tsitsitseng

Li-stabilizer lia hlokahala e le hore pH ea tharollo e bolokoe boemong bo fanoeng. Ho bolokoa ha moriana, ts'ebetso ea ona le botsitso ba thepa ea lik'hemik'hale ho latela boemo ba acidity. Ha ho etsoa lihormone tsa ente ho bakuli ba nang le lefu la tsoekere, hangata phosphates e sebelisetsoa morero ona.

Bakeng sa insulin e nang le zinc, li-stabilizer tsa tharollo ha li hlokehe kamehla, kaha li-ion tsa tšepe li thusa ho boloka botsitso bo hlokahalang.

Haeba li sebelisoa leha ho le joalo, metsoako e meng ea lik'hemik'hale e sebelisoa sebakeng sa phosphates, kaha motsoako oa lintho tsena o lebisa ho sethethefatsi le ho se sebetse hantle ha moriana.

Thepa ea bohlokoa e bonts'itsoeng ho bohle ba tsitsitseng ke polokeho le ho se khone ho kena lipakeng ka insulin.

Ngaka e nang le bokhoni ea endocrinologist e lokela ho sebetsana le khetho ea lithethefatsi tse ka kenngoang tsoekere bakeng sa mokuli ka mong.

Mosebetsi oa insulin ha se feela ho boloka tsoekere e tloaelehileng maling, empa hape ha se ho lematsa litho tse ling le litsamaiso tse ling. Setlhare se lokela ho se nke lehlakore ka mokhoa oa lik'hemik'hale, se tlase haholo 'me ka theko e tlase se khonehe.

Ho boetse ho bonolo haholo haeba insulin e khethiloeng e ka tsoakoa le mefuta e meng ho latela hore na ketso e kae.

Ho fumana insulin, mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso, Biotechnology - Coursework

1. Sebopeho le mesebetsi ea insulin 5

1.1. Sebopeho sa molek'hule ea "insulin"

1.2. Bohlokoa ba tlhaho ea insulin 7

1.3. Insulin Biosynthesis 8

2. Ho tsoaka liphatsa tsa lefutso tsa genetic 10

2.1. Tšebeliso ea mekhoa ea boenjiniere ea liphatsa tsa lefutso bakeng sa litlhare tsa 10

2.2. Mekhoa ea boenjiniere ba liphatsa tsa lefutso 11

2.3. Tlhahiso ea tlhahiso ea "insulin" ea tlhaho

Leave Ba Fane Ka Tlhaloso Ea Hao